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ニワトリ脊髄における運動ニューロン誘導因子

鸡脊髓运动神经元诱导剂

基本信息

批准号：
05780571
负责人：
太田訓正
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

運動ニューロン発生初期の細胞死においては、NGFファミリーであるニューロトロフィンが栄養因子として、レセプター型チロシンキナーゼ(RTK)であるtrkファミリーがそれらのレセプターとして運動ニューロンの生存に関与していると考えられている。動物の生体内においてRTKは増殖因子、栄養因子のレセプターとして働き、細胞の増殖・分化・決定など重要な役割を担っているので、運動ニューロンの誘導に関与する因子のレセプターもRTKの可能性がある。そこで私は運動ニューロン細胞表面を特異的に認識するモノクローナル抗体SC1を用いたパンニング法によりニワトリ胚脊髄から運動ニューロンを精製し、チロシンキナーゼのよく保存された領域に対するプライマーを用いてRT-PCR法を行なった。23種類のチロシンキナーゼが得られ、レセプター型は19種類、非レセプター型は4種類であった。解析を行なった時点で未知の分子であると考えられるものは8種類あった。次にこれら8個のクローンについてin situ hybridizationを行ない脊髄における分布を調べた。クローンtk-14は脊髄において運動ニューロンに強く発現していた。E14の脊髄を用いて作製したcDNAライブラリーをスクリーニングし、全長の配列を決定した。私が単離したRTKは1gドメイン、システイン-リッチドメイン、2つのFNIIIドメインおよびkinaseドメインからなるephファミリーに属し、マウスで報告されているSek(Segmentally expressed kinase)のホモローグであると考えられたので、avian Sekと名づけた。In situ hybridization法による解析からavian Sekは脊髄において腕部と腰部の運動ニューロンに強く、未分化な細胞からなるependimal cell layerに弱く発現していた。Avian SekはE5から発現し始めE6〜E7がピークとなり、E14では検出できなった。現在までに得られている結果から、avian Sekは、運動ニューロンの初期発生において重要な役割を行なっていると考えられる。

The cell death in the initial stage of the development of the movement is related to the development of the movement, NGF and NGF, and the development of the movement is related to the development of the movement. In vivo, RTK is involved in the regulation of reproductive factors, growth factors, differentiation of cells, and the regulation of motor activity. For the specific recognition of the surface of the cell, the RT-PCR method was used to refine the cell surface. 23 kinds of Analysis of unknown molecules The next step is to adjust the distribution of 8 different species in situ hybridization. Tk-14 is the most powerful weapon in the world. E14 's backbone is controlled by cDNA translation, and its full length is determined. RTK 1g, 1g In situ hybridization method, the analysis of avian Sek is performed on the wrist and waist. The movement of the wrist and waist is strong and the undifferentiated apical cell layer is weak. Avian Sek The results of the study are as follows: