ミクログリアIL2受容体の発現調節と脳の発生過程における役割

小胶质细胞IL2受体表达的调控及其在大脑发育中的作用

• 批准号: 05780586
• 负责人: 澤田 誠
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780586/
• 关键词: ミクログリア; インターロイキン2受容体; サイトカイン; ネットワーク; in situ RNA検出; 定量的PCR; 混合グリア培養

脳のサイトカインネットワークで中心的な役割を果たすミクログリアはインターロイキン2(IL2)により増殖促進されるたが、マクロファージには作用がない。これはミクログリアの発生や起源を知る上で重要であると考え、本研究でその性質を調べた。1.IL2受容体の発現はmRNA、タンパクともにリポポリ多糖で活性化したときにのみ見られた。このときリコンビナントIL2の添加によりミクログリアは増殖し、これは抗IL2受容体抗体で抑制された(投稿準備中)。2.混合グリア培養ではリコンビナントIL2の効果は見られず、抗IL2受容体抗体で特異的に染色される細胞は同定できなかった。しかし本研究で確立したIL2受容体mRNAの定量的PCR(後述)ではミクログリアの増大に伴ったmRNAの増加が見られた。3.in situ RNA検出のためにIL2受容体alpha鎖cDNAの薬700bp断片をin vitro RNA発現ベクターにクローニングした。このベクターにより得られるセンスとアンチセンスRNAはフィルター上のマウスIL2受容体DNAやmRNAを検出できた。さらにIL2受容体cDNAに約300bpの欠失を導入して定量的PCRの標準テンプレートとしてIL2受容体alpha鎖mRNAの定量法を確立した。4.精製ミクログリアをリポポリ多糖で活性化するとin situ RNA検出がてきたが、混合グリア培養でミクログリアが増加する時期のin situ RNA検出では特異的な検出が得られなかった。5.脳のサイトカインネットワークでミクログリアが関与するサイトカイン受容体の発現やサイトカインによる調節について調べた(研究発表)。以上の結果からIL2依存的なミクログリアの増殖は正常な周産期にはあまり関与がなく、むしろ炎症などによる病態時における増殖に関与すると考えられる。

脳 の サ イ ト カ イ ン ネ ッ ト ワ ー ク で center な "を cut fruit た す ミ ク ロ グ リ ア は イ ン タ ー ロ イ キ ン 2 (IL2) に よ り raised colonization promote さ れ る た が, マ ク ロ フ ァ ー ジ に は role が な い. こ れ は ミ ク ロ グ リ ア の 発 origin of the raw や を know る で important で あ る と え test, this study で そ の nature を adjustable べ た. 1. The IL2 by let body の 発 now は mRNA, タ ン パ ク と も に リ ポ ポ リ polysaccharide で activeness し た と き に の み see ら れ た. こ の と き リ コ ン ビ ナ ン ト IL2 の add に よ り ミ ク ロ グ リ ア し は raised colonization, こ れ は anti IL2 by let inhibition of antibody で さ れ た (contribute to). 2. Mixed グ リ ア cultivate で は リ コ ン ビ ナ ン ト IL2 の unseen fruit は see ら れ ず, anti IL2 で let body antibody specific に dyeing さ れ は る cells with fixed で き な か っ た. し か し で this research established し た IL2 by let body mRNA の quantitative PCR (described below) で は ミ ク ロ グ リ ア の raised big に partner っ た mRNA の raised plus が see ら れ た. 3. The in situ RNA 検 out の た め に IL2 by alpha let body lock cDNA の 薬 700 bp を fragment in vitro RNA 発 now ベ ク タ ー に ク ロ ー ニ ン グ し た. こ の ベ ク タ ー に よ り have ら れ る セ ン ス と ア ン チ セ ン ス RNA は フ ィ ル タ ー on の マ ウ ス IL2 by let DNA や mRNA を 検 out で き た. さ ら に IL2 by let body cDNA に lost about 300 bp の owe を import し て quantitative PCR の standard テ ン プ レ ー ト と し て IL2 by alpha let body lock mRNA の を quantitative method to establish し た. 4. Refined ミ ク ロ グ リ ア を リ ポ ポ リ polysaccharide で activeness す る と in situ RNA 検 give が て き た が, mixed グ リ ア cultivate で ミ ク ロ グ リ ア が raised plus す の る period in situ RNA 検 give で は specific な 検 out が must ら れ な か っ た. 5. 脳 の サ イ ト カ イ ン ネ ッ ト ワ ー ク で ミ ク ロ グ リ ア が masato and す る サ イ ト カ イ ン by let body の 発 now や サ イ ト カ イ ン に よ る adjust に つ い て adjustable べ た 発 table (research). の above results か ら IL2 dependent な ミ ク ロ グ リ ア の raised colonization は normal な foreign-born に は あ ま り masato and が な く, む し ろ inflammation な ど に よ る pathological when に お け る raised colonization に masato and す る と exam え ら れ る.

项目成果

錫村明生: "Eflects of microglia-derived cytokines on astrocyte proliferation." Restarative Newclogy and Neuroscience. 5. 347-352 (1993)

Akio Shizumura：“小胶质细胞衍生的细胞因子对星形胶质细胞增殖的影响。” Restarative Newclogy and Neuroscience 5. 347-352 (1993)

澤田 誠: "Regulation of astrocyte proliferation by Prostaglaudiu E_2 and the alpha subtype at protein kinasec." Brain Research. 613. 67-73 (1993)

Makoto Sawada：“Prostaglaudiu E_2 和蛋白激酶 c α 亚型对星形胶质细胞增殖的调节。” 613. 67-73 (1993)。

錫村明生: "Transforming growth factor-B suppresses cectwation and proliferation of microglia in vitro" Journal of Immanology. 151. 2150-2158 (1993)

Akio Shizumura：“转化生长因子 B 抑制体外小胶质细胞的生长和增殖”《免疫学杂志》151. 2150-2158 (1993)。