脳を標的としたバイオターゲティングとその遺伝子のクローニング

大脑的生物靶向及其基因克隆

• 批准号: 10145252
• 负责人: 澤田 誠
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10145252/
• 关键词: ミクログリア; 遺伝子導入; 脳特異的; バイオターゲティング; 血液脳関門

1 脳特異的な細胞移入の調節メカニズムの検討ラット個体を用いてミクログリアの脳特異的侵入の条件を検討し、外来遺伝子を脳に特異的に発現させることに成功した。また、導入した遺伝子産物の活性測定によって細胞の移入量を定量することができるようになった。(1) マクロファージ注入の場合、脳にはほとんど蛍光細胞が見られないが肝臓には多く見られた。ミクログリア注入の場合には脳には多く、肝臓にはわずかしか見られなかった。(2) lacZ発現ベクターを導入した細胞を注入したラット脳切片でlacZ陽性細胞が確認できた。(3) 2と同様の切片でのβ-galactosidase活性が検出できた2 組換えファージの生物活性のスクリーニングの確立培養脳血管内皮細胞による再構成血液脳関門システムでミクログリアの血液脳関門を形成している血管内皮細胞への特異的接着現象が再現できるようになった。3 脳特異的な細胞移入に関与する分子の単離同定ミクログリア細胞株からmRNAを精製してcDNAを合成し、ファージディスプレイライブラリーに組み込みをおこなった。また、ランダムペプチドライブラリーも作成し脳特異的接着に関わる脳側の因子(ホーミングレセプター)の検索も行える準備が整った。

1. The regulation of specific cell migration and the detection of specific invasion conditions in individuals. The detection of specific invasion conditions in foreign genes was successful. The activity of the introduced gene products was measured and the amount of cells transplanted was quantified. (1)When injecting macronutrients, light cells can be seen everywhere, and liver cells can be seen everywhere. In the case of injection, it is necessary to reduce the number of cases and reduce the number of cases. (2)lacZ positive cells were confirmed by injection of lacZ positive cells into the cells. (3)2. The activity of β-galactosidase in the same section was detected in two groups. The biological activity of β-galactosidase was detected in two groups. The activity of β- 3. Molecular isolation and purification of mRNA from cell lines related to specific cell migration For example, if you want to make a decision, you can make a decision. If you want to make a decision, you can make a decision.

项目成果

Kunihiko Asakura: "Differentiation-specific mRNA expression of a mouse bipotential gloal cell line" Neurosci Lett. 258. 21-24 (1998)

Kunihiko Asakura：“小鼠双能球细胞系的分化特异性 mRNA 表达” Neurosci Lett。

Makoto Sawada: "IL-10 inhitaits both production of cytokines and expression of cytokine receptors in microglia" J.Neurochem.in press. (1999)

Makoto Sawada：“IL-10 抑制小胶质细胞中细胞因子的产生和细胞因子受体的表达”J.Neurochem.in press。

Makoto Sawada: "Brain-specific gene expression by immotalized microglial cell-mediated gene transfer in the mammalian brain" FEBS Letters. 433. 37-40 (1998)

Makoto Sawada：“哺乳动物大脑中通过永生化小胶质细胞介导的基因转移实现大脑特异性基因表达”FEBS Letters。

Makoto Sawada: "Pathophysidogical significance of cytokine network in the brain" Brain and Biodifence (Oomura,Y and Hori,T eds.). 217-228 (1998)

Makoto Sawada：“大脑中细胞因子网络的病理生理学意义”Brain and Biodifence（Oomura，Y 和 Hori，T eds.）。

Akihide Takeuchi: "Microglial NO induces delayed neuronal death following acute injury in the stiatum" Eur.J.Neuroscience. 10. 1613-1620 (1998)

Akihide Takeuchi：“小胶质细胞 NO 在纹状体急性损伤后诱导延迟性神经元死亡”Eur.J.Neuroscience。