HL-60細胞の分化に特異的なNADaseのcDNAクローニングとその機能解析

HL-60细胞分化特异性NADase的cDNA克隆及其功能分析

• 批准号: 05858087
• 负责人: 仁科 博史
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05858087/
• 关键词: HL-60細胞; NADase; レチノイン酸; エクトエンザイム; ADP-リボース; CD38; アメフラシ; セカンドメッセンジャー

当初計画したように、「HL-60細胞の分化に特異的なNADaseの実体」を解明することができ、非常に興味ある新しい知見が多々得られた。この成果は(J.Biol.Chem.,268,16895-16898,1993)に公表された。前骨髄球性白血病細胞株HL-60細胞で、ビタミンAの誘導体であるレチノイン酸(RA)により特異的に発現誘導されるNADase(NAD glycohydrolase)が活性部位を細胞外に向けているエクトエンザイムであること、代謝産物であるADP-リボースにより細胞の分化誘導が促進されることを我々のグループは見い出していた。本研究では、これらの生理的役割を明らかにするために本酵素活性を担う分子の同定を行った。その結果、1.本NADaseはヒトリンパ球表面抗原CD38分子であること、2.CD38分子内の活性を担う領域は、N末端近傍の細胞内領域及び膜貫通領域は必要無く細胞外領域だけで十分であること、3.CD38遺伝子発現は、ホルボルエステル(PMA),ジメチルスルホキシド(DMSO)やジブチリルcAMPによっては誘導されず、RAによってのみ特異的に誘導されることを明らかにした。興味深いことに、海産動物のアメフラシ(Aplysia)で発見されたNADを基質にニコチンアミドと環状ADP-リボースを産生する酵素(ADP-ribosyl cyclase)と上記CD38分子は構造上酷似しており、動物細胞にも環状ADP-リボースをセカンドメッセンジャーとするCa^<2+>放出機構が存在するか否かという新らしく魅力的な問題が浮かび上がった。現在、CD38分子の生理的役割の解明及び環状ADP-リボース合成活性能を有する分子の検索へと研究は展開されている。

The original project,"HL-60 cell differentiation in specific NADase in vivo," explained this, very interesting new knowledge to see more. J. Biol.Chem., 268, 16895 - 16898, 1993). Proosteoblastic leukemia cell line HL-60 cells are characterized by specific induction of NADase(NAD glycoprotein), active site, extracellular induction of ADP, metabolite, and differentiation promotion of RA. In this study, the physiological activity of the enzyme was investigated. The results are as follows: 1. CD38 molecular domain of CD38 protein was detected by NADase; 2. CD38 intramolecular domain of CD38 protein was detected by NADase; 3. CD38 protein was detected by PMA protein; 4. CD38 protein was detected by NADase; 5. CD38 protein was detected by NADase; 6. CD38 protein was detected by NADase; 7. CD38 protein was detected by NADase; 8. CD38 protein was detected by NADase; 9. CD39 protein was detected by NADase; 9. CD39 protein was detected by NADase; 9. CD A special induction for RA In marine animals, there is a strong interest in the discovery of ADP-ribosyl cyclase and CD38, which is similar in molecular structure to the NAD matrix and cyclic ADP-free enzyme. In animal cells, the existence of a cyclic ADP-free enzyme and Ca^<2+> release mechanism is a problem of charm. At present, the molecular molecular model for the elucidation of CD38 physiological activity and its cyclic ADP-binding activity is under development.

项目成果

Kenji Kontani: "NAD glycohydrolase specifically induced by retinoic acid in human lekemic HL-60 cells.Identification of the NAD glycohydrolase as leukocyte cell surface antigen CD38" Journal of Biological Chemistry. 268. 16895-16898 (1993)

Kenji Kontani：“在人白血病 HL-60 细胞中由视黄酸特异性诱导的 NAD 糖水解酶。将 NAD 糖水解酶鉴定为白细胞细胞表面抗原 CD38”《生物化学杂志》。

仁科 博史: "Annual Review細胞生物学1993 (矢原一郎、御子柴克彦、月田承一郎 編)" 中外医学社, 349 (1993)

Hiroshi Nishina：“Annual Review Cell Biology 1993（由 Ichiro Yahara、Katsuhiko Mikoshiba 和 Joichiro Tsukita 编辑）”Chugai Igakusha，349 (1993)