ATPアナログ認識可能な変異MAPキナーゼを利用した標的リン酸化基質の探索

使用可识别 ATP 类似物的突变 MAP 激酶搜索目标磷酸化底物

• 批准号: 16659020
• 负责人: 仁科 博史
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659020/
• 关键词: ストレス; MAPキナーゼ; ノックアウトマウス; 神経変性疾患; 好中球; PI3キナーゼ; 細胞老化; アポトーシス

先に申請者らは、ストレス応答性のMAPキナーゼシグナル伝達系であるJM(/SAPK系の生理的役割を明らかにする目的で、本シグナル系を正に制御する活性化因子SEK1/MKK4や、MKK7ノックアウトマウスを作出し、JNK系が肝芽細胞の増殖・生存など肝形成に必須の役割を果たしていることを明らかにした。また、これまでに神経変性疾患DRPLAの原因遺伝子の産物がJNKの基質となり活性制御を受けていること、また、好中球の活性酸素産生時にアダプター分子であるGab2がERKによってリン酸化され、リン脂質キナーゼであるPI3キナーゼの活性調節に関与することを見い出している。本年度は、SEK1やMKK7を欠損する胚性線維芽細胞の解析から、JNKがc-Junのリン酸化を介して細胞周期G2/M期促進や細胞老化抑制に関与することに加えて、細胞の状態に応じてJNK系のアポトーシス誘導能に変化が生じることを見い出した(Nat.Cell Biol.6,215-226,2004,J.Biol.Chem.279,1621-1626,2004,J.Biochem.[review]136,123-126,2004)。これらの成果は、JNKがc-Jun以外の標的の存在を強く示唆し、本研究目的の一つを達成したと考えられる。一方、放射標識された非天然型のATPアナログの合成とこれをリン酸化反応の基質として利用可能な点変異MAPキナーゼを作製することによって、変異MAPキナーゼだけが標的分子に放射標識されたγ位のリン酸基を転移できるような実験系では実用化に向けて、高非活性のATPアナログの合成や細胞膜を透過しにくい非天然型ATPアナログを細胞内に導入する条件が検討されている。

First に applicants ら は, ス ト レ ス 応 a sexual の MAP キ ナ ー ゼ シ グ ナ ル 伝 da system で あ る JM (/ SAPK cut を の physiological service and Ming ら か に す る purpose で, this シ グ ナ を ル department is に suppression す る activation factor SEK1 / MKK4 や, MKK7 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を make し の raised, JNK が liver bud cells, colonization Save な ど liver formation に must cut を の service fruit た し て い る こ と を Ming ら か に し た. ま た, こ れ ま で に 経 god - disorder DRPLA の reason but 伝 child の product が JNK の matrix と な り active suppression を by け て い る こ と, ま た, good ball の active acid produced when に ア ダ プ タ ー molecular で あ る Gab2 が ERK に よ っ て リ ン acidification さ れ, リ ン lipid キ ナ ー ゼ で あ る PI3 キ ナ ー ゼ の activity regulating に masato And する とを とを see て る る. This year は, SEK1 や MKK7 を owe loss す る embryonic line d bud cells の parsing か ら, JNK が c - Jun の リ ン acidification を interface し て cell cycle G2 / M phase や cells aging inhibiting に masato and す る こ と に plus え て state, cell の に 応 じ て JNK is の ア ポ ト ー シ ス can induce に variations change が raw じ る こ と を see い out し た (N Ats. J Cell Biol. 6215-226200-4, J.B iol. Chem. 279162 1-1626200-4, J.B iochem. [review] 4, 136123-126200). こ れ ら の results は, JNK が c - Jun outside の mark の を strong く business し, the purpose of this study indicated a つ の を reached し た と exam え ら れ る. Side, radiation logo さ れ た non natural の ATP ア ナ ロ グ の synthetic と こ れ を リ ン acidification anti 応 の matrix と し て using may な point - different MAP キ ナ ー ゼ を cropping す る こ と に よ っ て, - different MAP キ ナ ー ゼ だ け が target molecules に radiation logo さ れ た gamma a の リ ン acid radical を planning move で き る よ う な be 験 department で は be to け in turn に て , high inactive の ATP ア ナ ロ グ の synthetic や を cell membrane through し に く い non natural ATP ア ナ ロ グ を intracellular に import す る conditions が beg さ 検 れ て い る.

项目成果

Transplantation of bone marrow cells reduces CCl4-induced liver fibrosis in mice

• DOI: 10.1111/j.1478-3231.2010.02364.x
• 发表时间: 2011-08-01
• 期刊: LIVER INTERNATIONAL
• 影响因子: 6.7
• 作者: Cho, Kyung-Ah;Lim, Goh-Woon;Ryu, Kyung-Ha
• 通讯作者: Ryu, Kyung-Ha

Requirement of MKK4 and MKK7 for CdCl2- or HgCl2-induced activation of c-Jun NH2-terminal kinase in mouse embryonic stem cells

• DOI: 10.1016/j.toxlet.2004.04.033
• 发表时间: 2004-09-10
• 期刊: TOXICOLOGY LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Matsuoka, M;Igisu, H;Nishina, H
• 通讯作者: Nishina, H

Stress induces mitochondria-mediated apoptosis independent of SAPK/JNK activation in ES cells.

应激诱导线粒体介导的细胞凋亡，与 ES 细胞中 SAPK/JNK 的激活无关。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Biol.Chem. 279
• 作者: Nishitai G;et al.
• 通讯作者: et al.

Mutations affecting liver development and function in Medaka, Oryzias latipes, s screened by multiple criteria.

通过多种标准筛选影响青鳉、Oryzias latipes 肝脏发育和功能的突变。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Mech.Dev. 121
• 作者: Tomomi Watanabe;et al.
• 通讯作者: et al.

Stem Cell and Liver Regeneration

干细胞和肝脏再生

• 发表时间: 2004
• 作者: Nishina H;et al.
• 通讯作者: et al.