内胚葉系幹細胞の発生と自己複製を制御するシグナル伝達系の解明

阐明控制内胚层干细胞发育和自我更新的信号转导系统

• 批准号: 17045013
• 负责人: 仁科 博史
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17045013/
• 关键词: ストレス; MAPキナーゼ; SEK1; MKK7; 肝芽細胞; ノックアウトマウス; メダカ; 内胚葉系器官; 発生・分化; 再生医学; シグナル伝達; 遺伝学; 細胞・組織

ストレス応答性のMAPキナーゼシグナル伝達系であるSAPK/JNK系を正に制御する2種類の活性化因子SEK1/MKK4やMKK7を欠損するキメラマウスやノックアウトマウスを作出し、本シグナル系が免疫応答や発生の制御に必須の役割を果たしていることを見出した。これらノックアウトマウスは肝形成不全を伴う致死となることから、肝形成にはSEK1とMKK7の両者が必須の役割を果たすことが示された。この解析過程で作製された抗Liv2と命名されたモノクローナル抗体は発生期の肝幹細胞である肝芽細胞を特異的に認識し、肝発生や再生の研究に有用なツールとなることが示された。抗Liv2抗体を用いたノックアウトマウスの定量的な解析から、1)SEK1とMKK7による強いSAPK/JNK活性化が内胚葉系の肝芽細胞の自己複製シグナルとして必須の役割を果たしていること、2)SAPK/JNKは転写因子c-Junを介して細胞周期G2/M期促進因子CDC2の遺伝子発現を調節していること、また、3)TNFαがその受容体を刺激すると、細胞死誘導シグナルであるカスパーゼ系の活性化に加えて、生存シグナルであるNFκB系と増殖シグナルであるSAPK/JNK系が活性化されるということを明らかにした。すなわち、"肝芽細胞が自己複製するか細胞死に至るかの運命決定はこれら3種のシグナル経路のバランスによって制御される"という概念が提示できた。また、肝臓を含む内胚葉系器官形成に関わる分子を網羅的に同定する目的で、遺伝学的な利点を有するメダカを用いた変異体の単離を行った。その結果、内胚葉形成や肝芽形成に影響のある遺伝子変異メダカを複数単離することに成功した。これら遺伝学や逆遺伝学が応用可能な2種類のモデル生物を用いて得られた研究成果は、内胚葉系幹細胞の発生と自己複製を制御する分子機構の解明に多大な貢献をすると期待される。

The SAPK/JNK system is responsible for the activation of two kinds of factors SEK1/MKK4 and MKK7. The system is responsible for the activation of two kinds of factors SEK1/MKK4 and MKK7. The liver formation is incomplete, and the liver formation is necessary. This analysis process is useful in the study of liver development and regeneration, especially in the identification of liver stem cells at the development stage. Anti-Liv2 antibodies are used to quantitatively analyze 1) SEK1 and MKK7, 2) SAPK/JNK, 3)TNFα, 4) CDC2, 4) CDC2, 5) CDC2, 6) CDC2, 7) CDC2, 7) CDC2, 8) CDC2, 9) CDC2, 10) CDC2, 11) CDC2, 12) CDC2, 11) CDC2, 12) CDC3, 13) CDC2, 14) CDC2, 15) CDC2, 16) CDC2, 18) CDC2, 19) CDC2, CDC2, 19) CDC3) CDC2, CDC3) Cell death induction: activation of NFκB system and proliferation of SAPK/JNK systemすなわち、"肝芽细胞が自己复制するか细胞死に至るかの运命决定はこれら3种のシグナル経路のバランスによって制御される"という概念が提示できた。The molecular structure of the embryo system is related to the development of the embryo system. The results, endoderm formation and liver bud formation were different. It is expected that the molecular mechanism of endodermal stem cell development and replication will contribute to the understanding of the possible application of genetic engineering and reverse engineering in two kinds of biological applications.

项目成果

Proteomic analysis of serum marker proteins in recipient mice with liver cirrhosis after bone marrow cell transplantation

• DOI: 10.1002/pmic.200500018
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: PROTEOMICS
• 影响因子: 3.4
• 作者: Yuichirou Yokoyama;S. Terai;T. Ishikawa;Koji Aoyama;Yohei Urata;Yoshio Marumoto;H. Nishina;K. Nakamura;K. Okita;I. Sakaida

新規核内複合体Daxx-RASSF1CはDNA損傷センサーとして機能してシグナルを核から細胞質へと伝達する

Daxx-RASSF1C 是一种新型核复合物，可作为 DNA 损伤传感器，将信号从细胞核传输到细胞质。

• 发表时间: 2006
• 期刊: 細胞工学 25
• 作者: Masahiko Kishimoto;et al.;北川 大樹ら
• 通讯作者: 北川 大樹ら

The JNK Signaling Pathway

• DOI: 10.1201/9781498713344
• 发表时间: 2006-02
• 作者: A. Lin

Lesson from the GFP/CC14 model-Translational Research Project: the development of cell therapy using autologous bone marrow cells in patients with liver cirrhosis.

GFP/CC14模型的教训——转化研究项目：利用自体骨髓细胞治疗肝硬化患者的细胞疗法的发展。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Hep.Panc.Surg. 12
• 作者: Shuji Terai;et al.
• 通讯作者: et al.

Fibroblast growth factor 2 facilitates the differentiation of transplanted bone marrow cells into hepatocytes

• DOI: 10.1007/s00441-005-0077-0
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: CELL AND TISSUE RESEARCH
• 影响因子: 3.6
• 作者: Ishikawa, T;Terai, S;Okita, K
• 通讯作者: Okita, K