ATPアナログを用いたMAPキナーゼ新規標的リン酸化基質の探索

使用 ATP 类似物寻找 MAP 激酶的新靶点磷酸化底物

• 批准号: 17657042
• 负责人: 仁科 博史
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657042/
• 关键词: ストレス; MAPキナーゼ; シグナル伝達; リン酸化; JNK

先に申請者らは、ストレス応答性のMAPキナーゼシグナル伝達系であるJNK/SAPK系の生理的役割を明らかにする目的で、本シグナル系を正に制御する活性化因子SEK1/MKK4やMKK7ノックアウトマウスを作出し、JNK系が肝芽細胞の増殖・生存など肝形成に必須の役割を果たしていることを明らかにした。また、SEK1やMKK7を欠損する胚性線維芽細胞の解析から、細胞の状態に応じてJNK系のアポトーシス誘導能に変化が生じること,JNKがc-Junのリン酸化を介して細胞周期G2/M期促進や細胞老化抑制に関与することを見い出した。さらにJNKの活性化機構の解析からは、SEK1とMKK7が協調して連続的にJNKをリン酸化するという新たなJNK活性化モデルを提唱している。MAPキナーゼファミリーが様々な生命現象の制御に関与していることを見い出したことから、次にこれらキナーゼの標的分子の探索を開始した。これまでに神経変性疾患DRPLAの原因遺伝子の産物がJNKの基質となり活性制御を受けていること、また、好中球の活性酸素産生時にアダプター分子であるGab2がERKによってリン酸化され、リン脂質キナーゼであるPI3キナーゼの活性調節に関与することを見い出した。本研究で我々は、着目する変異キナーゼだけが標的分子をアイソトープラベルされる実験系の開発を開始した。我々は既に、シクロヘキシルアデノシンから有機合成や酵素反応を利用した[γ-32P]-シクロヘキシルATPの合成に成功している。また、3次元構造解析の結果を基にしたキナーゼ分子内のATPポケットの解析から点変異JNKを作製済みである。

The applicant has previously identified the physiological activity of JNK/SAPK as a key factor in the development and survival of liver bud cells. The analysis of embryonic lineal cells, cell status, JNK system induction and differentiation, and JNK c-Jun acidification mediated cell cycle G2/M phase promotion and cell aging inhibition were also discussed. In addition, the analysis of the activation mechanism of JNK also provides a new JNK activation device for the coordinated and connected activation of JNK by SEK1 and MKK7. The discovery of molecular control of biological phenomena begins. This is a result of the production of the causative gene of DRPLA, which is involved in the regulation of JNK matrix activity, and the production of ERK by Gab2, ERK, and PI3. This study is aimed at the development of a novel molecular biology system. We successfully synthesized ATP by using [γ-32P]-sirucol as an enzyme in organic synthesis. The results of the three-dimensional structure analysis are based on the analysis of ATP in the molecule.

项目成果

The JNK Signaling Pathway

• DOI: 10.1201/9781498713344
• 发表时间: 2006-02
• 作者: A. Lin

Development of cell therapy using autologous bone marrow cells for liver cirrhosis

• DOI: 10.1007/s00795-005-0298-z
• 发表时间: 2005-12-01
• 期刊: Medical Molecular Morphology
• 影响因子: 1.8
• 作者: Sakaida, Isao;Terai, Shuji;Okita, Kiwamu
• 通讯作者: Okita, Kiwamu

Human homologue of Maid (HHM) is a useful marker protein in hepatocarcinogenesis.

Maid 的人类同源物 (HHM) 是肝癌发生中有用的标记蛋白。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Gastroenterology 128
• 作者: Taro Takami;et al.
• 通讯作者: et al.

Fibroblast growth factor 2 facilitates the differentiation of transplanted bone marrow cells into hepatocytes

• DOI: 10.1007/s00441-005-0077-0
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: CELL AND TISSUE RESEARCH
• 影响因子: 3.6
• 作者: Ishikawa, T;Terai, S;Okita, K
• 通讯作者: Okita, K

Autoamplification of NFATc1 determines its essential role in bone homeostasis.

NFATc1 的自动扩增决定了其在骨稳态中的重要作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Exp.Med. 202
• 作者: Masataka Asagiri;et al.
• 通讯作者: et al.