神経成長円錐におけるG蛋白共役系とチロシンキナーゼ系の相互作用

神经生长锥中G蛋白偶联系统与酪氨酸激酶系统的相互作用

• 批准号: 06780576
• 负责人: 五十嵐 道弘
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780576/
• 关键词: 成長円錐; 情報伝達; C-キナーゼ; チロシンキナーゼ; シナプス前終末; 開口分泌; G蛋白; G蛋白共役受容体

神経成長円錐を単離して、チロシンリン酸化を受ける蛋白を免疫プロッティングで検出したところ、少なくとも10種類の異なる蛋白が存在することが分かった。これらを膜結合性のものと可溶性のものに分けて、抗ホスホチロシン抗体のアフィニティーカラムにより、部分精製を行った。それぞれ数種類の異なる蛋白を含んでいるので、さらに現在、各バンドの固定を進めている。G蛋白及びチロシンキナーゼの下流にある情報変換機構として、C-キナーゼがあるが、本年はC-キナーゼのうち、nPKC(Ca^<2+>非依存性)のものを調べた。nPKCのうち、成長円錐ではδPKCが主に存在していた。シナプトソームでは、ホルボールエステル刺激に依ってδPKCは膜から可溶性画分へ移行するが、成長円錐では反対に、可溶性画分から膜へ移行することを見いだした。δPKCはβPKCと異なり、膜骨格には存在せず、GAP-43とは共存していなかった。nPKCの活性化条件下で成長円錐での蛋白リン酸化はアラキドン酸により、抑制された。これはδPKCの性質を反映していると考えられる。成長円錐の成熟にともなう開口放出の変化を調べるために、シナプス前終末に特異的な蛋白の変化を調べたところ、シナプス小胞の融合に必要な蛋白の大部分が成長円錐にも存在することが証明された。大量の開口放出を引き起こすα-ラトロトキシンを用いた実験から、成長円錐には制御性の弱い開口放出能がすでに備わっていることが明らかとなった。一方、制御性の強い開口放出に関与するシナプトフィジンやシナプシン1の量は、幼若な成長円錐では少量であることが示された。現在、制御機構の成熟化に研究の視点をおいて、解析している。

There are 10 different kinds of proteins in the growth of the brain. The membrane binding activity and soluble activity of the antibody were analyzed and partially refined. There are several different kinds of protein, including protein, protein and protein. G protein and its downstream information conversion mechanism, C-Q-Q-Q nPKC In the case of a protein receptor, the protein receptor is stimulated by a PKC receptor, and the protein receptor is stimulated by a PKC receptor.δ PKC βUnder the condition of activation of nPKC, the protein in the growth cone was acidified and inhibited. The nature of PKC is reflected in the following. This proves that most of the proteins necessary for cell fusion exist in the growth cone. A large number of openings are released, and the α-ray emission is used to control the opening energy. A small amount of water is added to the surface of the body. The viewpoint of research on the maturity of regulatory agencies is now in the process of analysis.

项目成果

五十嵐道弘: "神経突起伸展とG蛋白質" BRAIN MEDICAL. 7(印刷中). (1995)

Michihiro Igarashi：“神经突延伸和 G 蛋白”BRAIN MEDICAL 7（出版中）。

Saito S.,et al.: "Decreased synaptic density in aged brains and its prevention by rearing under enriched enviroment as revealed by synaptophysin contents." J.Neurosci.Res.39(1). 57-62 (1994)

Saito S.,et al.：“根据突触素含量显示，老年人大脑中突触密度降低，并通过在丰富的环境中饲养来预防这种情况。”

Strittmatter SM,et al.: "GAP-43 amino terminal peptides modulate reowth cone morphology and neurite outgrowth." J.Neurosci.14(9). 5503-5513 (1994)

Strittmatter SM 等人：“GAP-43 氨基末端肽调节 reowth 锥形态和神经突生长。”

Igarashi M.,et al.: "Characteristics of gangliosides including 0-acetylated species,in growth cone membranes at several developmental stages of rat forebrain." Dev.brain Res.78(1). 17-24 (1994)

Igarashi M.,et al.：“大鼠前脑多个发育阶段生长锥膜中神经节苷脂（包括 0-乙酰化物质）的特征。”