シナプス形成時における成長円錐からシナプス終末への変化過程の分子機構の研究

突触形成过程中生长锥向突触末端转化过程的分子机制研究

• 批准号: 07680837
• 负责人: 五十嵐 道弘
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680837/
• 关键词: 成長円錐; SNARE複合体; SNARE仮説; 合成ペプチド; シンタキシン; ボツリヌス毒素

成長円錐の機能の一つは神経突起の伸長であり、このためには膜面積の拡大が生ずる必要がある。報告者は「シナプス小胞の融合と同じメカニズムで小胞融合が成長円錐で生じて、その結果、突起の膜面積が拡大する」という仮説を立て、その検証を行った。膜融合に必須の蛋白質シンタキシンを選択的に分解する活性を有するボツリヌス毒素C1を培養神経細胞に投与すると、成長円錐の退縮が生じた。成長円錐の退縮は成長円錐機能の抑制を意味するので、シンタキシンが成長円錐の機能に必須であることが証明された。さらに、この過程をビデオで観察すると、小胞の多い領域の面積が選択的に縮小し、中に多数の巨大空胞が集積する像が観察された。これらの空胞は小胞同士が融合して形成される像も観察された。また、これらの空胞の表面積の総和が成長円錐での突起の膜面積拡大に相当するものであることが、画像解析によって示された。従って、巨大空胞は、毒素処理によって小胞が膜に融合出来ず、過剰に蓄積した小胞同士の異常な融合で形成されることが明らかとなった。さらに成長円錐の表面をFITC-WGAでラベルすると、成長円錐の螢光強度は経時的に減弱するが、毒素処理群ではその消退が遅延することを見いだした。これは成長円錐で膜付加が生じていることを証明している。また合成ペプチドを用いた実験から、シンタキシンと相互作用をする蛋白はVAMP及びα-SNAPであることが示唆された。よって、成長円錐ではシンタキシンが他の蛋白とSNARE複合体を形成して、膜小胞の形質膜への融合が起こり、膜面積が拡大して突起が成長することが証明された。

The function of the growth cone is to elongate the nerve, and the area of the membrane is to expand. The reporter replied,"The fusion of small cells is the same as that of small cells. The fusion of small cells results in the growth of cones, the results, and the membrane area of protrusions." Membrane fusion is essential for protein formation and selective degradation. It is important for cell culture to produce protein. Growth cone retraction and growth cone function inhibition In this process, the area of many small cells is reduced, and the image of many large cells is observed. The space cells fuse together to form a new image. In addition, the sum of the surface areas of these empty cells is quite large due to the large membrane area of the protrusions in the growth cone, which is shown in the image analysis. In addition, large cells and toxin processing cells are fused together, and abnormal fusion of small cells is formed. The fluorescence intensity of the growth cone was decreased during the treatment of the toxin. The growth of the cone is due to the increase in production. The synthesis and interaction of VAMP and α-SNAP are discussed. The formation of SNARE complexes, the fusion of membrane vesicles, and the growth of membrane protrusions were demonstrated.

项目成果

五十嵐 道弘: "成長円錐の情報伝達系" 蛋白質核酸酵素. 40. 1100-1114 (1995)

五十岚道宏：“生长锥的信息传输系统”蛋白质核酸酶。40。1100-1114（1995）

五十嵐道弘: "神経突起伸展とG蛋白質" BRAIN MEDICAL. 7. 149-155 (1995)

Michihiro Igarashi：“神经突延伸和 G 蛋白”《BRAIN MEDICAL》7. 149-155 (1995)。

Igarashi M et al.: "Ligand-induced growth cene collapse." Journal of Neuroscience. 15. 5660-5667 (1995)

Igarashi M 等人：“配体诱导的生长场景崩溃。”