関節リウマチ患者の活性化T細胞はSCIDマウスにヒトと同じ関節炎を誘導し得るか

来自类风湿性关节炎患者的活化 T 细胞能否在 SCID 小鼠中诱发与人类相同的关节炎？

• 批准号: 06770244
• 负责人: 坂田 敦子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770244/
• 关键词: 慢性関節リウマチ(RA); SCIDマウス; T細胞

【目的】慢性関節リウマチ(RA)は免疫細胞の湿潤、滑膜の増殖、軟骨、骨破壊を伴う難治性の関節炎で、その病因の一つとして自己反応性T細胞の関与が示唆されている。我々は、ヒトRA患者T細胞による関節炎発症モデル作製のため、患者T細胞のSCIDマウスへの移入を試みたが、直接T細胞を移入したのでは、多くの場合一過性の弱い関節炎であった。そこで今回、T細胞を予めin vitroにてPHA,OKT3,ヒトタイプIIコラーゲン(CII)で刺激し、活性化した後、SCIDマウスへ移入したところ、滑膜の絨毛化、fibrosis,軟骨および骨破壊を伴う重篤な関節炎を誘導し得ることを見い出した。【方法】RA患者滑液中よりSRBCロゼット法にてT細胞を精製した(CD^+Tcell>90%,NUB2^+Bcell<3%)。これらT細胞を無刺激又は10μg/mlPHA,1-5μg/ml OKT3,40μg/ml CIIで72hr培養し、洗浄後、2.5〜10×10^6 cellsを右膝関節腔および腹腔に移入した。30〜45日後、関節を病理組織学的に解析した。【結果及び考察】RA無刺激T細胞移入実験では約半数が関節炎を発症した。しかし他の発症できなかった群においてもPHA,OKT3,CII刺激により、滑膜の肥厚増大、絨毛化あるいはfibrosis,軟骨破壊に到る関節炎の増強が見られた。この重篤な関節炎はT細胞移入側と反対側未処置の左膝関節にも見られ、両側性に発症していた。Controlとして、正常末梢血T細胞をPHA,OKT3等で刺激したものでは、無変化又はわずかな滑膜の肥厚が見られるのみであり、上記の重篤な関節炎はGVHDによるものではないと考えられた。また、関節炎発症SCIDマウスの血清中にはヒトIgG,IgM,リウマトイド因子は見出されない事から、この発症に於けるB細胞の関与は否定された。さらにRAとの合併がしばしばみられるシェ-グレン症候群との関連を調べるために、重篤な関節炎を発症した12例について唾液腺を検索したが、全て正常であった。このことは、関節浸潤T細胞のTCRは関節特異的な抗原を認識している可能性を示唆している。以上の事から、ヒトRA滑液T細胞をin vitroで活性化後、SCIDマウスへ移入して発症する関節炎モデルはT細胞によるRAの発症モデルとして有用であると考えられた。

【 objective 】 chronic masato section リ ウ マ チ は immune cells (RA) の moist, synovial の raised colonization, cartilage, bone broken 壊 を with う refractory の masato section で, そ の causes a つ の と し て T cells themselves against 応 sex の masato and が in stopping さ れ て い る. I 々 は, ヒ ト RA patients with T cell に よ る masato section inflammatory disease of 発 モ デ ル cropping の た め, T cells in patients with の SCID マ ウ ス へ の to try を み た が, direct t-cell を move し た の で は, multiple く の occasions transient の weak い masato section inflammation で あ っ た. Youdaoplaceholder0 で で this time, T cells を for めin Vitro に て PHA, OKT3, ヒ ト タ イ プ II コ ラ ー ゲ ン (CII) で stimulus し, active し た, SCID マ ウ ス へ move し た と こ ろ, synovial の fluff, fibrosis, cartilage お よ び bone broken 壊 を with heavy う Benedict な masato section inflammation induced し を have る こ と を see い out し た. 【 method 】 in patients with RA synovial よ り SRBC ロ ゼ ッ ト method に て t-cell を refined し た (CD ^ + Tcell > 90%, NUB2 ^ + Bcell < 3%). <s:1> れらT cellsを were unstimulated and <s:1> 10μg/mlPHA,1-5μg/ml OKT3,40μg/ml CIIで were cultured for 72 hours. After <s:1> washing, 2.5-10×10^6 cellsを right knee joint cavity および abdominal cavity に were transplanted into た. The に histopathological analysis of the を of the joint 30 to 45 days later is た た. 【 Results and び investigation 】 in RA, there is no stimulation for T cell migration. Experimental で で approximately half of the patients have が arthritis を, and the occurrence is <s:1> た. し か し he の 発 disease で き な か っ た group に お い て も PHA, OKT3, CII stimulus に よ り, synovial の hypertrophy raised big, fluffy あ る い は fibrosis, cartilage broken 壊 に to る masato section inflammation の raised strong が see ら れ た. <s:1> severe な joint inflammation <e:1> T cell transplantation side と contralateral side of the <s:1> left knee joint not placed に common view られ bilateral に occurrence て て た た. Control と し て, normal peripheral blood T cell を PHA, OKT3 で stimulus such as し た も の で は, no variations and は わ ず か な synovial の hypertrophy が see ら れ る の み で あ り, written の heavy Benedict な masato section inflammation は GVHD に よ る も の で は な い と exam え ら れ た. ま た, masato section inflammation 発 SCID マ ウ ス の serum に は ヒ ト IgG, IgM, リ ウ マ ト イ ド factors は see out さ れ な い matter か ら, こ の に 発 disease in け る B cells の masato and は negative さ れ た. さ ら に RA と の merger が し ば し ば み ら れ る シ ェ - グ レ ン syndrome と の masato even を adjustable べ る た め に, Benedict な masato section inflammation を 発 disease し た 12 cases に つ い て salivary gland を 検 cable し た が, whole て normal で あ っ た. The な antigens specific to the <s:1> TCR る of the kines-infiltrating T cells are を recognized. The possibility of <s:1> て る る る を suggests that て て る る る る suggests る る る る. Above の matter か ら, ヒ を ト RA synovial T cells in vitro after で activeness, SCID マ ウ ス へ move し て 発 disease す る masato section inflammation モ デ ル は T cells に よ る RA の 発 disease モ デ ル と し て useful で あ る と exam え ら れ た.