デンドライトパッチ法による小脳可塑性シナプスの解析

使用树突贴片法分析小脑可塑性突触

• 批准号: 07780728
• 负责人: 高木 博
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780728/
• 关键词: PC12細胞; 開口放出; エンドサイトーシス; プルキンエ細胞; カルシウムチャネル

(1)PC12細胞で観察される2種類の開口放出とエンドサイトーシスシナプス前膜のモデルである、PC12細胞に対して膜容量測定法とカルシウム濃度測定法を用いて開口放出とエンドサイトーシスのカルシウム濃度依存性を調べた。その結果細胞内カルシウム濃度上昇時にPC12細胞は2種類の時間経過の異なる開口放出とエンドサイトーシスを起こすことが判った。時間経過の速い開口放出は細胞内カルシウム濃度が10μM以上になると生じるのに対して、時間経過の遅い開口放出は細胞内カルシウム濃度が5-10μMの時でも観察された。更には時間経過の速い開口放出はその後に時間経過の速いステップサイズの小さなエンドサイトーシスを伴うのに対して、時間経過の遅い開口放出は時間経過の遅いステップサイズの大きなエンドサイトーシスを伴うもので有った。(J. Physiol. 1996 in press)(2)ラット小脳プルキンエ細胞の樹状突起上のカルシウムチャネルホールセルパッチクランプ法と冷却CCDカメラによる細胞内カルシウムイメージング法をラット小脳スライスに適用しプルキンエ細胞の樹状突起上のカルシウムチャネルの性質を検討した。その結果プルキンエ細胞の細胞体付近にはアガトキシン感受性のP型カルシウムチャネルが多く存在するが、樹状突起部にはP型カルシウムチャネルはほとんど存在せず、むしろニッケルイオンに感受性を有するT型やR型カルシウムチャネルが多く存在することが判った。(生物物理学会1995、薬理学会1996)

(1) PC12 cells で 観 examine さ れ る 2 kinds の opening release と エ ン ド サ イ ト ー シ ス シ ナ プ ス membrane before の モ デ ル で あ る, PC12 cells に し seaborne て membrane capacity measurement と カ ル シ ウ ム concentration measurement を with い て opening release と エ ン ド サ イ ト ー シ ス の カ ル シ ウ ム concentration dependence を adjustable べ た. そ の results intracellular カ ル シ ウ ム concentration rises に PC12 cells は 2 kinds の time 経 の different な る opening release と エ ン ド サ イ ト ー シ ス を up こ す こ と が convicted っ た. Opening time 経 の speed い release は intracellular カ ル シ ウ が ム concentration above 10 microns に な る と raw じ る の に し seaborne て, time 経 の 遅 い opening release は intracellular カ ル シ ウ ム concentration が 5-10 mu M の で も 観 examine さ れ た. More に は time 経 の speed い opening release は そ の 経 に time after の speed い ス テ ッ プ サ イ ズ の small さ な エ ン ド サ イ ト ー シ ス を with う の に し seaborne て, time 経 の 遅 い opening release は time 経 の 遅 い ス テ ッ プ サ イ ズ の big き な エ ン ド サ イ ト ー シ ス を with う も の で have っ た. (J. Physiol. 1996 in Small press) (2) ラ ッ ト 脳 プ ル キ ン エ cells の dendritic protrusions on の カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル ホ ー ル セ ル パ ッ チ ク ラ ン プ method と cooling CCD カ メ ラ に よ る intracellular カ ル シ ウ ム イ メ ー ジ ン グ method を ラ ッ ト small 脳 ス ラ イ ス に applicable し プ ル キ ン エ cells の dendritic protrusions on の カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル の nature を 検 please Youdaoplaceholder0 た. そ の results プ ル キ ン エ cells の cell body pay nearly に は ア ガ ト キ シ ン susceptibility の p-type カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル が す more く る が, dendritic protrusions に は p-type カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル は ほ と ん ど exist せ ず, む し ろ ニ ッ ケ ル イ オ ン に susceptibility を have す る T や R カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル が す more く る こ と が convicted Youdaoplaceholder0. (Biophysical Society 1995, Pharmaceutical Society 1996)

项目成果

宮川博義、高木博、渡部重夫: "スライス標本中の特定ニューロンにおけるカルシウム濃度の高速測定" 細胞工学. (印刷). (1996)

Hiroyoshi Miyakawa、Hiroshi Takagi、Shigeo Watanabe：“切片制剂中特定神经元钙浓度的快速测量”《细胞工程》（印刷版）。