ショウジョウバエ概日時計関連タンパク質の検索

搜索果蝇生物钟相关蛋白

• 批准号: 07854054
• 负责人: 松本 顕
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07854054/
• 关键词: 概日時計; リズム; ショウジョウバエ; 遺伝子; period gene

概日機構の分子レベルでの解析をめざし、PERと相互作用するタンパク質を分離するために酵母two hybrid systemを用いたcDNAライブラリスクリーニングを行った。しかし、残念ながらpossitive cloneを得ることはできなかった。そこで、われわれが新たに分離した時計突然変異系統から突然変異遺伝子を分離し、その遺伝子のコードするタンパクがPERと相互作用するかどうかをtwo hybrid systemを使って検定することにした。突然変異誘発に利用したトランスポゾンP-elemntの末端部分の配列を使って、lnverse PCR、Anchor PCRなどの方法によりトランスポゾン挿入部分周辺のgenomic DNAをシークエンスした。いまだ、最終的な結論は得られていないが、以下のことがわかった。われわれが新たに分離した突然変異体は、以前から報告されている時計遺伝子Andanteのalleleであること。しかし、クローニングした配列は既知のものとはホモロジーがなかった。今後の課題として、cDNAの全長クローニングおよび、PERとの相互作用の有無の確認が挙げられる。

Molecular analysis of the mechanism, PER, interaction, quality, separation, yeast two hybrid system is used for cDNA analysis.しかし, 愿ながらpossitive cloneを得ることはできなかった.そこで、われわれが新たにSeparationしたThe timepiece suddenly changed the systemからThe sudden change changed the legacy and the sonを separatedし、その缝子のコードするタンパクがPERとinteraction するかどうかをtwo The hybrid system is the same as the original one. The use of sudden changes in the terminal part of P-elemnt, lnverse PCR, and Anchor PCRなどの method is used to insert part of the circumferential genomic DNA into the エンスした.いまだ、Final conclusion は得られていないが、The following のことがわかった.われわれが新たに　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 partiesleg in a foreign body は, previous から reportしかし, クローニングしたmatching row は 知のものとはホモロジーがなかった. Future projects include: Confirmation of the presence or absence of the interaction between cDNA and full-length cDNA, and PER.