ショウジョウバエ概日時計関連タンパク質の検索

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概日機構の分子レベルでの解析をめざし、PERと相互作用するタンパク質を分離するために酵母two hybrid systemを用いたcDNAライブラリスクリーニングを行った。しかし、残念ながらpossitive cloneを得ることはできなかった。そこで、われわれが新たに分離した時計突然変異系統から突然変異遺伝子を分離し、その遺伝子のコードするタンパクがPERと相互作用するかどうかをtwo hybrid systemを使って検定することにした。突然変異誘発に利用したトランスポゾンP-elemntの末端部分の配列を使って、lnverse PCR、Anchor PCRなどの方法によりトランスポゾン挿入部分周辺のgenomic DNAをシークエンスした。いまだ、最終的な結論は得られていないが、以下のことがわかった。われわれが新たに分離した突然変異体は、以前から報告されている時計遺伝子Andanteのalleleであること。しかし、クローニングした配列は既知のものとはホモロジーがなかった。今後の課題として、cDNAの全長クローニングおよび、PERとの相互作用の有無の確認が挙げられる。