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神経母細胞の不等分裂コントロールによる脳内概日ペースメーカー細胞培養系の確立

控制神经母细胞不等分裂建立脑内昼夜节律起搏细胞培养体系

基本信息

批准号：
19650070
负责人：
松本顕
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19650070/
关键词：
概日リズムショウジョウバエ培養神経母細胞不等分裂

项目摘要

ショウジョウバエ神経芽細胞の不等分裂に関与するbrat遺伝子発現のコントロールにより、脳内に存在する概日ペースメーカー細胞からの安定培養株樹立をめざし、4項目の研究を行った。まず、mCD8に対する抗体を使用して、 mCD8を発現transgenic系統の脳内の神経が効率よく分離できるかを試した。氷冷PBS下で20匹の3齢幼虫の中枢神経系を取り出し、コラゲネース□で処理後にさらにディスパーゼ処理を行うことによって、ピペッティングのみによって神経細胞をマイルドに解離することができた。続いて抗mCD8抗体を用いた磁気ビーズ法により7-8割程度の解離神経細胞を分離することができた。これにより、任意の脳内の神経細胞を分離する手法が確立できた。第2段階として、 pdf-gal4:mCD8::GFP系統とbrat RNAi系統の交配により、腫瘍化して無隈分裂可能なペースメーカー細胞の分離を試みた。上記と同様の方法で分離を試みたが、得られた神経細胞は、野生型と比較してサイズが非常に小さく、また形態も不均一であった。腫瘍化との関連が考えられるが、メカニズムの詳細は明らかではない。第3段階として、分離した神経細胞からの発光リズム計測を行った。前年度は細胞が早期に死んでしまい、1振動しか観察できなかったため、本年度は培養液組成・添加物の検討を行った。 Schnider培地にN-2とインシュリンを添加することで、2振動までは観察できるようになったが、3振動目を安定に観察することは稀にしかできなかった。一方、第4項目として、磁気ビーズで分離した脳内神経細胞から安定培養株の樹立も目指した。通常のM3培地では2日ほどで細胞は死滅した。そこで、上記の培地内で培養すると、分離した細胞自体は1週間以上生存したが、細胞分裂は起きず、安定培養株は樹立できなかった。

There is no difference between the cell division of the sprouts, the unequal division of the cells, the unequal division of the sprouts, and Antigens and mCD8 antibodies were detected by Elisa and mCD8 in the transgenic system. The detection rates were separated from each other. Under the cold PBS, the central nervous system of the larvae was used to extract and dissociate the worms. After the treatment, they were told that they would not be able to do so. The anti-mCD8 antibody was isolated from the cell by magnetic resonance method. If you don't want to do anything, you can use any method to make sure that you are in a position to separate your cells. In the second paragraph, the pdf-gal4:mCD8::GFP system, the brat RNAi system, the mating cell, the mating cell, the cell. The same method was used to separate the cells, the wild type was much smaller than the wild type, and the shape was uneven. I don't know what to do. I don't know what to do. In the third paragraph, we will tell you how to do this, and we will tell you how to do it. In the previous year, the cell died in the early stage, 1 vibrating the cell to inspect the dead cell, and this year, the culture solution was made up of additives. Schnider, please do not add any information to the hospital, 2 to monitor the safety of the hospital, and 3 to monitor the safety of the equipment. One party, item 4, magnetic equipment and magnetic equipment are separated from each other, and the diazepam cultivation plant is set up. Usually, M3 cultivates the ground for 2 days and the cells are dead. In the fields of culture, culture and isolation, the cells of isolated cells survive for more than 1 year, cell division begins, and diazepam plants are isolated.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

時間生物学事典「生物リズムの研究法ショウジョウバエ. 」の項目

时间生物学百科全书“研究果蝇生物节律的方法”。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Moriyama Y;Sakamoto T;Karpova SG;Matsumoto A;Noji S;Tomioka K;松本顕
通讯作者：
松本顕

bHLH-ORANGEファミリー遺伝子による時計遺伝子の発現調節

bHLH-ORANGE 家族基因对时钟基因表达的调节

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
伊藤太一;高橋邦明;鵜飼-蓼沼磨貴;上田泰己;上田龍;谷村禎一;松本顕
通讯作者：
松本顕

period gene of Bactrocera cucurbitae (Diptera : Tephritidae) among strains with different mating times and sterile insect technique.

不同交配时间和昆虫不育技术的菌株中葫芦实蝇（双翅目：实蝇科）的周期基因。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Ann. Entomol. Soc. Am. 101
影响因子：
0
作者：
Matsumoto A;Ohta Y;Itoh TQ;Sanada-Morimura S;Matsuyama T;Fuohikawa T;Tanimura T;Mivatake T
通讯作者：
Mivatake T

cwo negatively regulates circadi、an transcription with bHLH-ORANGE family genes.

cwo 负向调节 circadi，这是一种 bHLH-ORANGE 家族基因的转录。