21番染色体転座によるAML1の機能変化と白血病発症機構の解明

阐明 21 号染色体易位导致的 AML1 功能变化和白血病发病机制

基本信息

批准号：
07770859
负责人：
田中智之
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770859/
关键词：
白血病 AML1 Evi-1 染色体転座転写因子

项目摘要

今回我々は,AML1の血液細胞の分化・増殖における機能,ならびに転写制御における活性を検討した.その結果,1. AML1aは,32Dc13細胞の顆粒球への分化を抑制し,さらにAML1bは,このAML1aの作用をキャンセルする.2. AML1bはPEBP2 siteに対し転写活性を有する.AML1aは,それ自身は転写活性化能をもたないが,AML1bによる転写活性をdominantに抑制する.3. AML1aは,AML1bに比べ高いaffinityでPEBP2 siteに結合する.ことが明らかとなった.3.により,AML1aのAML1bに対するdominant negativeな作用は,PEBP2 siteへの結合の競合によるものであると考えている.また,1.と2.の結果より,AML1による転写活性化が,血液細胞のmyeloid系への分化に必須なものであることが推定される.次に、AML1の構造異常がどのようなメカニズムでleukemic transformationをひきおこすか調べるために、t(3 ; 21)により産生されるAML1/Evi-1融合タンパク質の機能解析を行った。この結果,融合タンパク質が転写因子として独立した2つの機能(1. AML1による転写活性化へのdominant-negativeな作用.2. Evi-1の第2zinc fingerドメインに依存したAP-1活性の上昇作用)を担うことが判明した。さらに,、AML1/Evi-1のmyeloid系への分化に対する影響を解析するために、32Dc13細胞において、AML1/Evi-1融合タンパク質および第2zinc fingerドメイン欠失変異体をstableに発現するクローンを樹立して解析した。その結果、融合タンパク質のAML1由来部位とEvi-1由来部位は、各々独立してmyeloid系への分化の抑制に関与することが明らかとなった。

在这里，我们研究了AML1在分化和增殖中以及转录调控的活性中的功能。结果，1。AML1A抑制了32DC13细胞在粒细胞中的分化，而AML1B取消了AML1A.2的作用。 AML1B具有针对PEBP2位点的转录活性。 AML1A本身没有转录激活能力，但它抑制了AML1B优势的转录活性3。 AML1A结合了比AML1B.3.3高的PEBP2位点。 AML1A对AML1B的主要负面影响是PEBP2。我们认为，这是由于与现场结合的竞争。此外，1和2的结果表明，AML1转录激活对于将血细胞分化为髓样系统至关重要。接下来，为了研究AML1中结构异常引起白血病转化的机制，我们对T（3; 21）产生的AML1/EVI-1融合蛋白进行了功能分析。该结果表明，融合蛋白作为转录因子的两个独立功能（1。对AML1;2。EVI-1的第二个锌指域依赖性AP-1活性效应的占主导作用作用）。此外，为了分析AML1/EVI-1对分化为髓样系统的影响，在32DC13细胞中建立了表达AML1/EVI-1融合蛋白和第二个锌指域缺失突变体的克隆和第二个锌指域缺失突变体。结果，揭示了融合蛋白的AML1衍生位点和EVI-1衍生的位点独立于抑制分化为髓样系统。