课题基金 / 基金详情

亜鉛フィンガーモチーフによるDNA認識と遺伝子ターゲティング

亜鉛フィンガーモチーフによるDNA認識と遺伝子ターゲティング
锌指基序的 DNA 识别和基因靶向
批准号：
10145226
负责人：
杉浦 幸雄
金额：
$1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10145226/
关键词：
亜鉛フィンガーDNA結合モチーフ遺伝子ターゲティング塩基認識転写制御人工蛋白質

项目摘要

项目成果

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亜鉛フィンガー型DNA結合モチーフは、その繰り返し構造ゆえに約3塩基ずつ認識するモジュールの連結体として見ることができ、このような特徴は亜鉛フィンガーモチーフの数を変化させることにより、任意の塩基数を認識させることが可能である。転写因子Sp1のCys_2-His_2型亜給フィンガニドメインを用いた18および27塩基加NA配列を認識する人工蛋白質の創製に始めて成功した。すなわち、Sp1の3個の亜鉛フィンガー領域を基本単位として、5アミノ酸残基のリンカーで連結させた新規蛋白質Sp1ZF6とSp1ZF9を遺伝子工学的に合成し、そのDNA結合様式ゲルシフト法、フットプリント法、メチル化干渉法などを用いて追究した。その結果、Sp1ZF6とSp1ZF9はほぼ同程度のDNA結合親和性を示した。また、GCボックスを3個連続して含むDNAフラグメントを用いて結合実験を行ったところ天然Sp1は互いに隣接しない位置に2公子結合するのに対し、Sp1ZF6とSp1ZF9はGCボックスの3'末端側の1ヶ所で1分子結合することが認められた。特に重要なことは、Sp1ZF6とSp1ZF9は、それぞれ連続した18および27塩基対配列に結合していることで、これは新規蛋白質が任意の長さの連続する非対称DNNA配列に選択的に結合できることを強く示唆している。このような亜鉛フィンガーによるDNA塩基認識を基礎にした新しい遺伝子制御分子の創製は、21世紀の遺伝子治療への貢献が期待される。
期刊论文(3)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
T.Kamiuchi: "Artificial Nine Zinc-Finger Peptide with 30 Base Pair Binding Sites" Biochemisrty. 37・19. 13827-13834 (1998)
T.Kamiuchi：“具有 30 个碱基对结合位点的人工九锌指肽”，生物化学 37・19（1998）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
今西 未来: "新規亜鉛フィンガータンパク質の創製" 化学. 53・7. 72-73 (1998)
今西未来：“新型锌指蛋白的创造”化学53・73（1998）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
M.Yokono: "Unique DNA Bindinh Mode of the N-Terminal Zinc Finger of Transcription Factor Sp1" Biochemisrty. 37・19. 6824-6832 (1998)
M. Yokono：“转录因子 Sp1 N 末端锌指的独特 DNA 结合模式”，生物化学 37・19（1998）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
世界最長のマルチ亜鉛フィンガーの創製と新機能
人工亜鉛フィンガーペプチドの創製、DNA認識および遺伝子制御
亜鉛フィンガーペプチドの創製、DNA認識および遺伝子制御
  • 批准号：
    01F00504
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.15万
  • 财政年份：
    2001
  • 负责人：
    杉浦 幸雄
  • 依托单位：
    Kyoto University
亜鉛フィンガーモチーフによるDNA認識と遺伝子ターゲティング
  • 批准号：
    12019236
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    杉浦 幸雄
  • 依托单位：
    Kyoto University
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