亜鉛フィンガーペプチドの創製、DNA認識および遺伝子制御

锌指肽的创建、DNA 识别和基因调控

• 批准号: 01F00504
• 负责人: 杉浦 幸雄
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00504/
• 关键词: 転写因子; DNA認識; 亜鉛フィンガー; 人工タンパク質; 結合モチーフ; 金属結合; 有害金属

天然亜鉛フィンガータンパク質における金属の意識と新しい人工亜鉛フィンガータンパク質の設計・創製を目標に、COEプロジェクト「元素科学」への貢献を目指している。本研究では、典型的な亜鉛フィンガータンパク質Sp1と各種金属イオンとの相互作用を検討した結果、鉄、銅、水銀などによってSp1の特にシステインの亜鉛配位が大きく影響を受け、おそらくシステイン2分子が酸化されジスルフィド結合を形成することが推測された。そこで、新たに天然亜鉛フィンガーモチーフ(CCHH)とは異なったAAHH型亜鉛フィンガーやシスチジンフィドを有する亜鉛フィンガーをペプチド合成によって作製した。現在、この新規亜鉛フィンガーを用いて、CDスペクトルによるタンパク質の折りたたみあるいはゲル電気泳動によるDNA結合性を検討中である。本研究はこれ迄まったく追究されていなかった天然亜鉛フィンガータンパク質のDNA結合に対する有害金属イオンの効果や亜鉛フィンガーと有害金属イオンとの相互作用による亜鉛フィンガー構造の変化に有用な情報を与えるばかりでなく、ジスルフィド結合を有する新しい亜鉛フィンガーの設計・創製にも貴重な知見を提供するのである、今後これらの実験実現するため、遺伝子化学、生化学、錯体化学などの種々の手法を駆使して包括的な研究を遂行する。

The contribution of COE to the design and creation of natural and artificial lead compounds in the field of metal consciousness and quality is pointed out in this paper. In this study, the interaction of typical lead atoms with various metal atoms was investigated. The interaction of iron, copper and mercury with Sp1 was strongly influenced by lead coordination, and the formation of acid binding between two molecules was speculated. A new type of lead oxide (CCHH) is used to prepare a new type of lead oxide. Now, this new regulation is in use, and the DNA binding property of CD is in the middle of the discussion. This study investigated the effects of natural lead on harmful metals in DNA binding and the interactions between lead and harmful metals in DNA binding, and provided valuable information on the design and creation of novel lead structures in DNA binding. In the future, research on genetic chemistry, biochemistry, and biological methods will be carried out.