创建识别 DNA/RNA 的新型金属指肽-猫眼课题宝

创建识别 DNA/RNA 的新型金属指肽

批准号：

11877371

负责人：

杉浦幸雄

金额：

$1.28万

依托单位：

Kyoto University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Exploratory Research

财政年份：

1999

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1999 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877371/

关键词：

核酸認識金属ペプチドモチーフ転写因子亜鉛フィンガー分子認識

项目摘要

项目成果

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DNA認識モチーフの一つである亜鉛フィンガーは、特徴ある構造及び、DNA認識様式を有することから、近年大きな注目を集めている。今回演者らは、ヒト由来転写因子SplのDNA認識部位を構成する亜鉛フィンガーの(Cys)2(His)2ドメインのうち、2つのCysをHis置換した(His)4ドメインを有する人工亜鉛フィンガーペプチドを創製し、その高次溝造の変化及びDNA認識様式を調べ、新規DNA認識金属モチーフとして機能しうるかを検討した。Spl3フィンガードメインのうち2番目のフィンガーに相当するSplf2C2H2とHis置換体であるSplf2H4をFmoc固相合成法により合成し、円二色性スペクトルを測定した。次に、Spl3フィンガードメインであるC2H2Spl及びH4Splを大腸菌により発現し、精製した試科について円二色性スペクトルを測定した。更に、H4SplのDNA結合能並びに認識様式を調べるために、ゲルシフト法、DNaseIフットプリント法、メチル化干渉法を行った。円二色性スペクトルの実験からSplf2H4及びH4SplはZnの添加により一定の二次構造をとることが確認された。ゲルシフト法およびDNaseIフットプリント法の結果から、H4SplはGCboxに対して結合し、メチル化干渉法により、その認識様式はC2H2Splに類似していることが分かった。

期刊论文(1)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Y.Aizawa: "comparison of the seguence-selective DNA binding by peptide dimers"Biochemistry. 38・5. 1626-1632 (1999)

Y.Aizawa：“肽二聚体的序列选择性 DNA 结合的比较”生物化学 38・5（1999）。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

世界最長のマルチ亜鉛フィンガーの創製と新機能

批准号：

16659028
项目类别：

Grant-in-Aid for Exploratory Research
资助金额：

$2.11万
财政年份：

2004
负责人：

杉浦幸雄
依托单位：

Doshisha Women's College of Liberal Arts (2005)Kyoto University (2004)

人工亜鉛フィンガーペプチドの創製、DNA認識および遺伝子制御

批准号：

04F04435
项目类别：

Grant-in-Aid for JSPS Fellows
资助金额：

$1.54万
财政年份：

2004
负责人：

杉浦幸雄
依托单位：

Doshisha Women's College of Liberal Arts (2005-2006)Kyoto University (2004)