核酸を認識する新しい金属モチーフの創製

创建识别核酸的新金属基序

• 批准号: 09878118
• 负责人: 杉浦 幸雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878118/
• 关键词: 核酸認識; 亜鉛フィンガー; 金属モチーフ; DNA結合; 転写調節; リプレッサー

亜鉛フィンガーは代表的なDNA認識モチーフであるが、亜鉛以外の他の金属を含有した金属モチーフは未だ自然界からは見つかっておらず、また人工的にも創製されていない。そこで、3個の亜鉛フィンガーを有する転写因子Sp1の直接の亜鉛配位アミノ酸であるシステイン残基のヒスチジン残基への置換を試み、新しい蛋白質による金属フィンガー形成能およびDNA結合能について検討した。しかし、システイン→ヒスチジン置換によって期待された他の金属、特に銅(II)フィンガーの形成およびそれによるDNA結合は、明確には認められなかった。次に、Sp1の2番目の亜鉛フィンガーに相当する約30個から成るペプチドを化学合成することを計画した。この際、天然に存在する唯一の銅(II)四面体蛋白質であるブルー銅蛋白質の情報から、1個のシステインをメチオニンに残基に置換したペプチドを設計・合成した。精製後、親規ペプチドを用いて銅(II)錯体を形成させ、そのESRスペクトルを測定したところ、典型的なペプチド-銅(II)錯体ESRパラメーターを与えた。この銅(II)フィンガーはDNA結合能を有することがわかったので、現在、ペプチド配位分子の最適化のための分子設計を行っている。

Lead represents DNA, and other metals other than lead contain metals that are not found in nature or created artificially. Three of the three lead atoms were found to be involved in the direct coordination of lead atoms with acid residues, and the substitution of lead atoms with protein residues was investigated. In addition, the formation of copper (II) and other metals is expected to result in DNA binding, which is clearly recognized. The second, Sp1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, The only copper (II) tetrahedral protein that exists in nature is designed and synthesized. After purification, the parent selection is used to determine the formation of copper (II) complex, and the ESR selection is determined. Typical copper (II) complex ESR selection is determined. The copper (II) complex has DNA binding energy and molecular design optimization.

项目成果

杉浦 幸雄: "DNA塩基配列およびDNA湾曲の認識" 有機合成化学協会誌. 55. 384-392 (1997)

Yukio Sugiura：“DNA 碱基序列和 DNA 曲率的识别”有机合成化学学会杂志 55. 384-392 (1997)。

T.Kamiuchi: "New Multi Zinc Finger Protein:Biosynthetic Design and characteristic sof DNA Recognition" Nucleic Acids Res.(Sym.Sen.). 37. 153-154 (1997)

T.Kamiuchi：“新型多锌指蛋白：DNA 识别的生物合成设计和特征”核酸研究（Sym.Sen.）。