CISファミリーによるJAKシグナルの制御機構と生理機能

CIS家族对JAK信号的控制机制和生理功能

基本信息

批准号：
10154202
负责人：
吉村昭彦
金额：
$ 19.2万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

造血因子やサイトカインの受容体はJAK型チロシンキナーゼが非共有結合によって会合しシグナルを細胞内に伝える。それらのシグナル伝達機構は近年著しい勢いで解明がすすめられているが、チロシンキナーゼの活性制御機構に関しては未知の領域が多い。我々はCIS3,JABがJAKに結合しJAKチロシンキナーゼを抑制する活性があることを明らかにした。本研究ではCIS3、JABによるノックアウトマウスを作成し生理機能の解明を行った。その結果(1)JABノックアウトマウスは正常に生まれてくるが生後3週間以内に全て死亡し、胸腺、脾臓の萎縮と肝臓での脂肪の蓄積および多くの組織で炎症様の単球の浸潤が見られた。これらの表現型の一部はIFNγトランスジェニックマウスに似ている。実際JAB-/-マウスとIFNγ-/-マウスのかけあわせによって症状が全く見られなくなった。またRag-/-マウスとのかけあわせによっても症状は消失した。したがってJAB-/-による個体の死はT細胞とインターフェロンγに依存することが示された。JABはT細胞においては活性化を抑え、非リンパ系細胞ではIFNγ感受性を決める分子である。(2)CIS3-/-ノックアウトは胎性致死であり、受精後12日以前は野生型と大きな形態の差はないが12.5-15日胚では全身での出血が見られた。また特に肝臓では構造が崩れており有核の胎児型赤血球で充満していた。胎児肝細胞をEPO存在下で培養すると野生型マウスにくらべてはるかに大きな前期赤芽球前駆胞コロニーが形成された。したがってCIS3は胎児造血幹細胞においてEPO/JAK2シグナルを負に調節する因子であることが示された。(3)さらにEGF受容体などのチロシンキナーゼを負に制御するc-CblがRINGフィンガードメインを介してユビキチンリガーゼE2と会合することを発見しチロシンキナーゼの新たな負の制御機構を提唱した。

造血因子和细胞因子的受体与JAK型酪氨酸激酶无共价相关，并将信号传递到细胞中。尽管这些信号转导机制近年来已经以显着的速度阐明了，但在调节酪氨酸激酶活性的机制方面存在许多未知领域。我们已经揭示了CIS3的JAB具有与JAK结合并抑制Jak酪氨酸激酶的活性。在这项研究中，使用CIS3和JAB创建了基因敲除小鼠以阐明其生理功能。结果（1）jab敲除小鼠是正常出生的，但所有人都在生命后3周内死亡，胸骨和脾脏萎缩，肝脏中脂肪的积累，许多组织中的炎性单核细胞浸润。这些表型中的一些类似于IFNγ转基因小鼠。实际上，由于戳刺 - / - 小鼠和IFNγ-/ - 小鼠之间的相互作用，未观察到症状。与抹布 - / - 小鼠合作后，症状也消失了。因此，结果表明，由于戳刺 - / - 导致的个体死亡取决于T细胞和干扰素γ。 JAB是一种抑制T细胞激活并确定非淋巴细胞中IFNγ敏感性的分子。（2）顺式 - / - 敲除胎儿致死，在受精后12天之前，野生型的形态没有显着差异，但是在第12.5-15天，在胚胎中观察到整体身体出血。另外，肝脏的结构特别破坏，并充满了核胎胎红细胞。在存在EPO的情况下，培养胎儿肝细胞的培养额比野生型小鼠大得多。因此，证明CIS3是对胎儿造血干细胞中EPO/JAK2信号负调控的一个因素。（3）我们还发现，C-CBL对酪氨酸激酶（例如EGF受体）进行负调节，通过环手指结构域将酪氨酸激酶（例如EGF受体）与泛素连接酶E2相关，并提出了酪氨酸激酶的新负调控机制。