Elucidation of the molecular mechanism of memory T cell exhaustion and development of its reprogramming method

阐明记忆T细胞耗竭的分子机制及其重编程方法的开发

• 批准号: 22K19444
• 负责人: 吉村 昭彦
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19444/
• 关键词: 腫瘍免疫; T細胞; 免疫記憶; 疲弊; 転写因子; CAR-T

記憶T細胞は慢性炎症や腫瘍環境では持続的な抗原刺激と何らかの環境因子によって疲弊状態(exhaustion)に陥る。結果的に疲弊化はがんにおける免疫チェックポイント療法の感受性を下げることになる。本研究は、メモリーT細胞の最終分化段階である「疲弊」の分子メカニズムを明らかにするとともに、これを解除ないし分化転換(リプログラミング)する方法を開発するものである。具体的には転写因子NR4aを中心に、腫瘍特異的な疲弊化メモリーT細胞を用いて疲弊化に重要な遺伝子を破壊ないし強制発現して、幹細胞性をもつステムセルメモリーT細胞(Tscm)に 転換させる方法を開発する。本年度はCD8特異的NR4a欠損マウスの樹立とヒトNR4a欠損CAR-T細胞の作成方法の確立と抗腫瘍効果の検証、さらにフィーターフリーによる試験管内 Tscm誘導法の確立を行った。特にフィーターフリー Tscmの誘導に関しては、既報にあるOP9由来の主要な分泌タンパク質17種類をそれぞれCAR-T細胞に添加しナイーブ(CCD7+CD45RA+)分画の増加を指標に検索したところCXCL12が最も強くナイーブ分画を誘導することを見出した。また、フィーダー細胞の培養上清中には含まれていないが、Tscm誘導を促進する因子としてIGF-Iを見出した。これらの因子を組み合わせてIL-7+IGF-I+CXCL12+Notch刺激が効率よくTscmを誘導することを見出した。このようにして作成したTscmは特にTCF7, LEF1, EOMES, BCL6, JUNなどのメモリーマーカー遺伝子発現が高く、逆にNR4a2,NR4a3,BATF,IRF4,PRDM1,TOXといった疲弊マーカー遺伝子の発現が低下していた。さらに個体レベルで強い抗腫瘍効果を発揮した。

Memory T cells <s:1> chronic inflammation や abscess environment で で holding 続 な antigenic stimulation と and ら <s:1> environmental factors によって exhaustion state に陥る. The に exhaustion of the results, がんにおける がんにおける immunotherapy チェッ を ポ <s:1> ト ト therapy <s:1> sensitivity を under げる げる とになる とになる. は, this study メ モ リ ー t-cell の eventually Duan Jie で あ る "exhausted disadvantages" の molecular メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に す る と と も に, こ れ を remove な い し differentiated planning in (リ プ ロ グ ラ ミ ン グ) す る method を open 発 す る も の で あ る. Specific に は planning write factor NR4a に を center, swollen sores specific な weakness disadvantages メ モ リ を ー T cells with い て exhausted disadvantages the traces of important な に 伝 son を broken 壊 な い し forced 発 now し て, stem cells を も つ ス テ ム セ ル メ モ リ ー T cells (Tscm) に planning in さ せ る method を open 発 す る. This year は CD8 specific NR4a owe loss マ ウ ス の set と ヒ ト NR4a owe damaged CAR - T cells の の consummate method established と resistance swollen sores unseen fruit の 検 certificate, さ ら に フ ィ ー タ ー フ リ ー に よ る test tube Tscm candidated の line established を っ た. Special にフィ タ タ フリ フリ Tscm の induced に masato し て は, both reported に あ る OP9 origin の main な secretion タ ン パ ク mass 17 kinds を そ れ ぞ れ CAR - T cells に add し ナ イ ー ブ (CCD7 + CD45RA +) draw の raised を index requirement by に 検 cable し た と こ ろ CXCL12 が most strong も く ナ イ ー ブ points draw を induced す る こ と を shows し た. ま た, フ ィ ー ダ の ー cells in culture supernatant に は containing ま れ て い な い が, induced Tscm を promote す る factor と し て IGF -i を shows し た. こ れ ら の factor を group み close わ せ て IL - 7 + IGF -i + CXCL12 + Notch stimulus が sharper rate よ く Tscm を induced す る こ と を shows し た. Youdaoplaceholder0 ように て to make た たTscm に t にTCF7, LEF1, EOMES, BCL6 JUN な ど の メ モ リ ー マ ー カ ー heritage 伝 発 が high く now, inverse に NR4a2, NR4a3, BATF, IRF4, PRDM1, TOX と い っ た exhausted disadvantages マ ー カ ー posthumous son 伝 の 発 now low が し て い た. The さらに individual レベ で で has a strong を anti-swelling effect を and a strong た effect.

项目成果

University de Sherbrooke(カナダ)

舍布鲁克大学（加拿大）

T細胞の疲弊と老化を司る転写因子; NR4a

控制 T 细胞耗竭和衰老的转录因子；NR4a

• 发表时间: 2023
• 作者: Fukushima Yuji;Sakamoto Keiko;Matsuda Michiyuki;Yoshikai Yasunobu;Yagita Hideo;Kitamura Daisuke;Chihara Misaki;Minato Nagahiro;Hattori Masakazu;竹馬 俊介;吉村昭彦
• 通讯作者: 吉村昭彦

NR4aによるT細胞疲弊機構とその解除による抗腫瘍免疫増強

NR4a介导的T细胞耗竭机制及其释放增强抗肿瘤免疫力

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉村昭彦;安藤眞;Tanakorn Srirat
• 通讯作者: Tanakorn Srirat

Massachusetts Institute of Technology(米国)

麻省理工学院（美国）

T細胞疲弊の解除による抗腫瘍効果増強

通过释放T细胞耗竭增强抗肿瘤效果

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉村 昭彦;安藤 眞;中川原 賢亮;三瀬 節子
• 通讯作者: 三瀬 節子