ユビキチンリガーゼAPCの構成蛋白質の同定とその活性制御機構の解明

泛素连接酶APC组成蛋白的鉴定及其活性控制机制的阐明

• 批准号: 10163244
• 负责人: 戸所 一雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10163244/
• 关键词: 蛋白質分解; ユビキチン; APC

細胞分裂を制御するユビキチン依存的蛋白質分解は後戻り出来ない細胞周期の制御機構として大変有効である。APC細胞分裂期特異的なユビキチンリガーゼであるが、その構成因子は出芽緯母では13個、啼乳動物では8個のサブユニットが同定されていたが、その違いについては不明であった。そこで出芽酵母のみで見出されているAPC10/DpclとAPC11をヒト細胞ら単離し構造を決定した。またこれら蛋白質は他のAPCと結合していること、細胞内局在もキネトコアと中心体にあり、APCと共通であることが判明した。したがってヒトと酵母ではAPCの構成蛋白質に違いはないと結論した。またAPCの活性制御に関しては、APCに結合しているCdc20がMPFによってリン酸化されるとN℃を活性化しCut2/PdslやCyclin Bをユビキチン化するが、PKAやMad2によって抑制されることを明らかにした。Cdc20は脱リン酸化されるとAPCの活性化は出来ない。またCdhlはMPFによりリン酸化されているとAPCに結合しないが、脱リン酸化されるとAPCに結合しAPCはCycin B等をユビキチン化する。これもPKAのリン酸化により抑制されるがMad2によっては制御されない。このようにM期のAPCは時期特異的に特異的基質を自然な時間の流れの中で巧みに制御されながらユビキチン化することが判明した。APCと活性化因子のリン酸化脱リン酸化、2種の活性化因子Cdc20とCdhl、チェックポイントによる阻害因子によって特異的基質をタイミング良くAPC活性は制御されることを明らかにした。

Cell division を suppression す る ユ ビ キ チ ン dependent protein decomposition after は 戻 り out な い cell cycle の system royal institution と し て big variations have sharper で あ る. APC cell division phase specific な ユ ビ キ チ ン リ ガ ー ゼ で あ る が, そ の constitute factor は budding weft mother で は 13, crow mammals で は eight の サ ブ ユ ニ ッ ト が with fixed さ れ て い た が, そ の violations い に つ い て は unknown で あ っ た. そ こ で budding yeast の み で shows さ れ て い る APC10 / Dpcl と APC11 を ヒ ト cells ら 単 from し tectonic を decided し た. ま た こ れ ら は he の APC protein と combining し て い る こ と, cells in も キ ネ ト コ ア と centrosome に あ り, APC と common で あ る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder5 たがってヒトと yeast で で APC <s:1> constitutes protein に contradicts the conclusion of に な と と と た た. ま た APC の active suppression に masato し て は, APC に し て い る Cdc20 が MPF に よ っ て リ ン acidification さ れ る と N ℃ を activeness し Cut2 / Pdsl や Cyclin B を ユ ビ キ チ ン change す る が, PKA や Mad2 に よ っ て inhibit さ れ る こ と を Ming ら か に し た. Cdc20 is <s:1> deacidified by リ and されると acidified, and APC is <s:1> activated <e:1> to produce な リ. ま た Cdhl は MPF に よ り リ ン acidification さ れ て い る と APC に combining し な い が, リ ン acidification さ れ る と APC に combining し APC は Cycin B etc を ユ ビ キ チ ン change す る. Youdaoplaceholder5 れ <s:1> PKA リ リ <s:1> acidification によ <s:1> inhibition されるがMad2によって されな control されな によって. こ の よ う に M の APC は age specific に specific substrate を nature な time の flow れ の で in qiao み に suppression さ れ な が ら ユ ビ キ チ ン change す る こ と が.at し た. APC と activation factor の リ ン acidification リ off ン acidification, two の activation factor Cdc20 と Cdhl, チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に よ る resistance against factor に よ っ て specific substrate を タ イ ミ ン グ good く APC active は suppression さ れ る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

小谷秀示ら: "PKA and MPF-actisated piho-like kinase negulates amaphase promoting complex activity and mitosis prosression" Molecular Cell. 1. 371-380 (1998)

Hideji Kotani 等人：“PKA 和 MPF 激活的 piho 样激酶调节无分裂期促进复合物活性和有丝分裂进展”Molecular Cell。

小谷秀示ら: "Substrate-and time-specifre APC activation by phosphorylation and regulatory factors" J.Cell Biol. (印刷中). (1999)

Hideji Kotani 等人：“通过磷酸化和调节因子实现底物和时间特异性 APC 激活”J.Cell Biol（出版中）。