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植物ホルモン-核-核様体コミュニケーションによるプラスチド遺伝子発現制御

植物激素-核素通讯调控质体基因表达

基本信息

批准号：
10170202
负责人：
佐藤直樹
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Saitama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10170202/
关键词：
プラスチド核様体サイトカイニン DNA結合タンパク質

项目摘要

プラスチドDNAの発現には,様々な核酸結合タンパク質と核様体構造タンパク質が関与している。本研究では,植物ホルモンが葉緑体の発達を制御する可能性を,葉緑体核様体を構成するDNA結合タンパク質の発現制御の観点から明らかにすることを目的とした。1. 免疫ブロット法により,プラスチド核様体には,RNA結合タンパク質cp29とcp33,T7タイプRNAポリメラーゼ・シグマ因子等が検出された。この他,N末端アミノ酸配列分析により,核様体標品には,いくつかの極めて疎水的なタンパク質が混入していることが判明したため,さらに核様体の精製法を改良する必要がある。2. 核様体タンパク質のcDNAとして,PN4とPN15を単離した。3. 黄化エンドウ上胚軸を切り取って寒天培地に植え込み,光を当てることにより緑化させることに成功した。この系では,サイトカイニンにより,葉の緑化が顕著に阻害されることがわかった。4. PENDタンパク質のmRNAを合成し,wheat germのin vitro translation系により,^<35>SでラベルされたPD2タンパク質を合成した。このタンパク質を葉緑体と混合して,光を当てることにより,in vitro importが起こり,トランジットペプチド(15残基)の切断がおきた。トリプシン処理の効果から,輸送されたタンパク質が,内包膜を貫通していると判断された。無傷葉緑体のプロテアーゼ消化実験も行い,認識部位の異なる2種類の抗体との反応性の結果から,N末端側が包膜の内側にあり,内包膜の外側にあるコイルドコイル領域で二量体を形成していると推定された。

The development of DNA is related to the nucleic acid binding and nuclear structure. The aim of this study is to investigate the possibility of chloroplast development and control in plants, and to investigate the mechanism of DNA binding in chloroplast development. 1. The RNA binding proteins cp29 and cp33, T7 and T4 are detected in the immune system. In addition, the N-terminal amino acid coordination analysis, nuclear sample standard, in the middle of the extremely high water quality of the mixed substances, in the middle of the identification, and now the nuclear sample purification method to improve the need for. 2. The DNA sequence of the DNA fragment was isolated from the DNA fragment PN4 and PN15. 3. Epicotyls are cut off from the cold, and the light is cut off from the green This is the first time that a tree has been planted. 4. PEND gene mRNA synthesis, wheat germ in vitro translation system, PD2 gene synthesis<35>The chloroplast is mixed, and the light is mixed, in vitro import, in vitro deletion (15 residues). The results of the treatment are as follows: transportation, quality and penetration of the inner coating are judged. In the process of non-injury chloroplast digestion, two kinds of antibodies and two kinds of antibodies were recognized at different sites. The results showed that the N-terminal side was located in the inner part of the envelope, and the outer part of the inner envelope was located in the outer part of the envelope.