マウス初期発生におけるWntシグナルの受容機構の解析

小鼠早期发育过程中Wnt信号接收机制分析

• 批准号: 10171213
• 负责人: 高田 慎治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10171213/
• 关键词: 発生; 形態形成; 細胞間相互作用; 受容体; シグナル分子

本研究ではWnt-3aシグナルの受容機構が発生過程で時間的空間的にどのように制御されているのかという問題を追及することを目的として、マウス胚におけるWnt-3a受容体の同定とその発現パターンの解析を行った。Wntシグナルの受容体としては、近年ショウジョウバエにおいてfrizzledが同定され、脊椎動物においても少なくとも9つのfrizzled遺伝子のクローニングが報告されている。一方、我々は川上と濃野によってニワトリからクローニングされた新規のfrizzled遺伝子(以下、frizzled-Xと呼ぶ)をプローブにして、そのマウスホモログのクローニングに成功した。この遺伝子は他のfrizzled遺伝子と同様7回膜貫通型の膜タンパク質をコードし、細胞外領域にはWntタンパク質との結合に関与すると考えられるcystein rich domainが存在していた。その発現は9.5日胚においてWnt-3aのシグナルによって増殖が促進される神経管の背側領域に認められたが、Wnt-3aが細胞増殖以外の作用を引き起こす沿軸中胚葉の前駆細胞や体節では認められなかった。このことから、frizzled遺伝子の発現そのものがWntシグナルに対する応答の多様性を決める一因になっている可能性が考えられた。また、以上の発現部域の他にも肢芽のapical ectodermal ridge発現していた。次に、同定された受容体がWntシグナルの役割の多様性の形成にどのように関連するのかを明らかにするため、受容体の欠落した変異体マウスを遺伝子ターゲティングで作製しようと考え、これまでにfrizzled-Xの遺伝子DNAをクローニングし、ノックアウトマウスの作製に必要なターゲティングベクターの作製を行った。

This study examines the spatial control of the body's growth process and time in Wnt-3a's new generation process. The title is the same as the target and the Wnt-3a receptor. It is analyzed and analyzed. WntシグナルのReceiverとしては、In recent yearsショウジョウバエにおいてfrizzledが同定され、 Vertebrate においても小なくとも9つのfrizzled 伝子のクローニングが report されている. On the one hand, I am 々は川上と野野によってニワトリからクローニングされた新码のfrizzled 伝子 (to Next, frizzled-XとHUぶ)をプローブにして,そのマウスホモログのクローニングにsuccessfulした.この缝子はhis のfrizzled 伝子と同様7-turn film penetration type の片タンパクquality をコードし、Extracellular domain にはWntタンパク性との合に关与すると考えられるcystein Rich domain exists.その発成は9.5 day embryo においてWnt-3a のシグナルによってgrowth promotion される神経ductのdorsal domain にcognitionめらIn addition, Wnt-3a has a role other than cell proliferation and has a role to play in the development of somatic segments along the axis of mesodermal cells.このことから、frizzled 伝子の発见そのものがWntシグナにに対する応 Answer の多様性をdetermine める一cause になっているpossibility が考えられた.また、The above の発 appear part area のhim にもlimb bud のapical ectodermal ridge発appears していた. Second, the same as the fixed receptor, Wntシグナルのservice cut, multiple 様性のformation and connection.るのかを明らかにするため、Receiver's body's の俉 した変different body マウスを缝子ターゲティングでproduced by しようと卡え、これまでにfrizzled-Xの缝子DNAをクローニングし, ノックアウトマウスの无码 なターゲティングベクターの做を行った.

项目成果

Ikeya, M., Lee, S.M.K., McMahon, A.P.& Takada, S.: "“The roles of Wnt signaling in the developing dorsal neural tube"in Keio University symposia for life science and medicine, vol.2 neural development" Springer-Verlag Tokyo, 5 (1999)

Ikeya, M.、Lee, S.M.K.、McMahon, A.P. 和 Takada, S.：庆应义塾大学生命科学与医学研讨会，第 2 卷神经发育中的“Wnt 信号传导在背侧神经管发育中的作用”Springer-东京出版社，5 (1999)

Kishida, M., Koyama, S., Kishida, S., Matsubara, K., Nakashima, S., Higano, K., Takada, R., Takada, S.& Kikuchi, A.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin." Oncogene. 18. 979-985 (1999)

Kishida, M.、Koyama, S.、Kishida, S.、Matsubara, K.、Nakashima, S.、Higano, K.、Takada, R.、Takada, S. 和 Kikuchi, A.：“Axin 预防 Wnt- 3a 诱导的 β-连环蛋白积累。”Oncogene. 18. 979-985 (1999)

Shibamoto, S., Higano, K., Takada, R., Ito, F., Takeichi,M.& Takada, s.: "Cytoskeletal reorganization by soluble Wnt-3a protein signaling" Genes Cells. 3. 659-670 (1998)

Shibamoto, S.、Higano, K.、Takada, R.、Ito, F.、Takeichi,M.

Ikeya, M & Takada, S.: "Wnt signaling from the dorsal neural tube is required for the formation of the medial dermomyotome." Development. 125. 4969-4976 (1998)

池谷，M

McMahon, J.A., Takada, S., Zimmerman, L.B., Fan, C.M., Harland, R.M.& McMahon, A.P.: "Noggin-mediated antagonism of BMP signaling is required for growth and patterning of the neural tube and somite." Genes Dev.12. 1438-1452 (1998)

麦克马洪，J.A.，高田，S.，齐默尔曼，L.B.，范，C.M.，哈兰，R.M.