テトラヒメナ・ミオシンの研究

四膜虫肌球蛋白的研究

基本信息

批准号：
10175203
负责人：
沼田治
金额：
$ 1.15万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10175203/
关键词：
テトラヒメナミオシン分子系統樹ミオシンサブグループ

项目摘要

我々はすでに抗体との反応性とK/EDTA-ATPase活性を指標としてTetrahymena pyriformisよりミオシンの精製に成功した。テトラヒメナ・ミオシンは分子量約22万の重鎖を持ち他の生物のミオシンより約40nm程長い尾部を持つ双頭の分子であること、K/EDTA-ATPase活性の値がウサギ骨格筋ミオシンよりも低い塩濃度で最大値を取ることなどユニークな性質を持つことが明かになった。しかし、テトラヒメナ・ミオシンを大量に精製することができなかったので、その実体を明らかにするため、テトラヒメナ・ミオシン遺伝子のクローニングを試みた。進化的に保存されたミオシン頭部の配列をプライマーとしてRTPCR法を試みた結果、すでにクローニングした3種類のミオシン遺伝子の他に新たに2種類のミオシン遺伝子が存在することを明らかにした。これら2つのミオシン遺伝子はT.thermophilaに存在するものであった。これら5種類のテトラヒメナ・ミオシンの部分アミノ酸配列と従来知られているミオシンのアミノ酸配列とを比較検討した結果、テトラヒメナ・ミオシン5種が他のミオシンサブグループと異なり新しいグループを作ることが明かになった。今後はこれら5種類のテトラヒメナ・ミオシン遺伝子の全塩基配列を決定し、その全体像を明かにする予定である。

我们已经使用抗体反应性和K/EDTA-ATPase活性作为指标成功地从四膜膜膜中纯化了肌球蛋白。据透露，四膜肌球蛋白具有重链，分子量约为220,000，是一个两头分子，尾巴比其他生物长40 nm，并且具有独特的特性，例如在较低的盐浓度下，k/edta-atpase活性比兔骨骼肌肉较低的盐浓度。但是，由于它无法净化大量的四膜肌球蛋白，因此我们试图克隆四捕甲肌球蛋白基因以阐明其物质。在尝试使用进化保守的肌球蛋白头部序列作为引物的RTPCR方法之后，我们透露，除了已经克隆的三个肌球蛋白基因外，还存在两个新的肌球蛋白基因。这两个肌球蛋白基因存在于T. thermothila中。在比较并检查了这五种类型的四膜肌球蛋白的部分氨基酸序列与先前已知的肌球蛋白氨基酸序列后，发现五种类型的四氢甲烷肌球蛋白形成了一组新组，与其他肌球蛋白亚组不同。将来，我们计划确定这五个四膜肌球蛋白基因的整个碱基序列，并揭示整体情况。