ヒトHIV・インテグレース補助する宿主核内因子SWI蛋白質の機能解析
支持人类 HIV 整合酶的宿主核因子 SWI 蛋白的功能分析
基本信息
- 批准号:10180235
- 负责人:
- 金额:$ 1.47万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:1998
- 资助国家:日本
- 起止时间:1998 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1. 研究目的:AIDSウイルスが体内に侵入してきてもヒトの染色体DNAに自らのDNAを挿入(プロウイルス化)できなければAIDSウイルスの爆発的増殖は起こらない。従って、AIDSウイルスのヒト染色体DNAへの侵入活性酵素であるIntegraseの作用機構が解明できれば,AIDSウイルスの爆発的増殖阻止が可能になると思われる。しかし、ヒトの染色体DNAは体(細胞核)の中では裸の状態ではなくHistoneと呼ばれる蛋白質を含む多くの蛋白質が絡みついたクロマチン構造をとっていることが知られており、実際どのようにしてヒトの染色体DNAに侵入するのかわかっていない。最近、ヒトAIDSウイルス(HIV)-Integraseが宿主因子(ヒトの細胞核中の蛋白質)を利用してヒトの染色体DNAに侵入していることが示唆された。興味深いことに、その蛋白質はクロマチンDNAから絡みついたHistoneなどの蛋白質を取り去り裸のDNAに近い状態にする活性を持つことが知られたSWI蛋白質であった。そこで本研究は、ヒトAIDSウイルス(HIV)-Integraseが宿主囚子SWI蛋白質を用いてどのようなメカニズムで染色体DNAに自らのDNAを挿入するのかを解明することを目的とした。2. 研究結果:(1) ヒトAIDSウイルス(HIV)-Integrasは大腸菌の中で不溶化してしまったが二つのアミノ酸に変異を導入し、可溶化することに成功した。10LのE.coli cellから1mgのIntegraseを精製することができた。(2) 宿主因子ヒトSWI蛋白質の精製:30LのHeLa cellからヒトSWI蛋白質の精製を試みたが約0.1ugしか精製できなかった。(3) 酵母SWI蛋白質の精製:40Lの酵母cellから酵母SWI蛋白質の精製を試みたところ約1ugが精製できた。
1. Objective: the aim of this study is to infect the population of AIDSs in vivo. The chromosomal DNA has been introduced from the DNA. The colonization of the AIDSs has been caused by the explosion of the colonization of the AIDS virus. The chromosomal DNA gene intruded into the active enzyme, and the mechanism of action of the active enzyme Integrase gene was explained. The colonization of the explosion caused by the AIDS enzyme was detected. In the DNA body (nucleus) of the chromosome, the DNA of the chromosome (nucleus) was found to be infected by the invasion of chromosome DNA into the cell. Recently, AIDS host factor (HIV)-Integrase host factor (protein in nucleus) is used to invade chromosomal DNA. The flavor is deep, the protein is dry, the protein is DNA, the protein is Histone, the protein is Histone, the protein is nude, the DNA is close, the activity is active, and the SWI protein is known. In this study, AIDS (HIV)-Integrase host prisoner SWI protein was inserted into chromosome DNA from DNA to explain the purpose of this study. two。 The results of the study were as follows: (1) the results of the study were as follows 10L "E.coli cell", "1mg", "Integrase", "fine", "please". (2) Host factor: 30L HeLa cell protein, SWI protein, 0.1ug protein, 0.1ug protein. (3) yeast SWI protein: 40L yeast cell protein, yeast SWI protein.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kobayashi,M: "DNA supercoiling factor localyzes to puffs on polytene vhromosomes in Drosophila" Mol.Cell.Biol. 18. 6737-6744 (1998)
Kobayashi,M:“DNA 超螺旋因子定位于果蝇多线染色体上的泡”Mol.Cell.Biol。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Usui,T: "Complex formation and functional versaltility of Mre11 of budding yeast in recombination" Cell. 95. 705-716 (1998)
Usui,T:“重组中芽殖酵母 Mre11 的复杂形成和功能多样性”细胞。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Lin,Y: "The HBV X protein is a cofactor of activated transcription that modulates the transcription machinery and disal binding activators" J.Biol.Chem. 273. 27097-27103 (1998)
Lin,Y:“HBV X 蛋白是激活转录的辅助因子,可调节转录机制和 disal 结合激活剂”J.Biol.Chem。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Okamoto,T: "Analysis of the role of TFIIE in transcriptional regulation through structure-function studies of TFIIEb" J.Biol.Chem. 273. 19866-19876 (1998)
Okamoto,T:“通过 TFIIEb 的结构功能研究分析 TFIIE 在转录调控中的作用”J.Biol.Chem。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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