ストローマ依存性の多能性幹細胞株の自己複製機構の解析

基质依赖性多能干细胞系自我更新机制分析

• 批准号: 10181210
• 负责人: 伊藤 克彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181210/
• 关键词: ストローマ; 造血幹細胞; 自己複製; レトロウイルス

マウスのストローマ細胞株MS-5は、ストローマ依存性多能性幹細胞株Myl-D-7の自己複製を支持する未知の機構を備えている。この機構の解明を目指し、平成10年度に、以下のことを行った。1。 ストローマ細胞株MS-5より得たの仏をレトロウイルスベクターに挿入し、ライブラリーを作成した。2。 このcDNAライブラリーをパッケージング細胞を介して、ストローマ依存性株Myl-D-7に遺伝子導入し、非依存性変異株を単離した。3。 しかし、単離した非依存性変異株の解析では、非特異的バックグランドが高いこと、cDNAの回収率が低いことにより、機構の解明に及ばなかった。4。 そこで、ベクターに以下の改変を行った。(1)ベクターに、バクテリオファージ由来のloxPの遺伝子配列を挿入した。(2)ベクター内にバクテリアでの選択薬剤耐性遺伝子を挿入した。5。 この改変したベクターを用いれば、(1)バクテリオファージのloxP/CREの系が応用可能である。単離した非依存性変異株より、loxP/CREの系による挿入cDNAの排斥、復帰変異株の再分離が可能である。復帰変異株分離による、バックグランドの低減化が期待できる。(2)挿入したバクテリアでの選択薬剤耐性遺伝子を用いて、ゲノムDNAからの回収率の向上が期待できる。6。 改変したベクターを用いて、再度、機構の解明を試みる予定である。

Cell line MS-5 is a multipotent stem cell line that supports replication by unknown mechanisms. This organization's explanation is clear, Heisei 10 years, the following is the line 1。The MS-5 cell line was successfully constructed. 2。This cDNA fragment was introduced into the cell and isolated from the dependent strain Myl-D-7. 3。The analysis of independent variant plants is high, the recovery rate of cDNA is low, and the resolution of mechanism is low. 4。The following changes were made. (1)The sequence of loxP genes from which the gene was derived was introduced. (2)In the case of a disease, the resistance gene of the selected drug is introduced. 5。This change is possible in the loxP/CRE system. Isolation and reisolation of independent mutants, loxP/CRE systems, insertion of cDNA, and recombination of mutants are possible. A reduction in the number of heterosis is expected. (2)In order to improve the recovery rate of DNA, we need to select the resistant genes to be used. 6。Change the name of the organization, change the name of the organization, and change the name of the organization.

项目成果

O'Prey J et al: "signaling mechanisms inodued in long-term growth of ELM ergthroleukemia cells" Blood. 91. 1584-1555 (1998)

OPrey J 等人：“ELM ergthroleukemia 细胞长期生长中的信号传导机制”血液。

Xue JH et al: "Induction of apg-1, a member of the heat shock protein 110 family, follwing transient forebrain ischemia in the rat brain" Biochem.Biophys.Res.Commun.247. 796-801 (1998)

Xu JH 等人：“大鼠大脑短暂前脑缺血后，热休克蛋白 110 家族成员 apg-1 的诱导”Biochem.Biophys.Res.Commun.247。

Nishiyama H et al: "Decreased expression of cold-induced RNA-binding protein(CIRP)in male germ cells at elevocted temperature" Am J Path. 152. 289-296 (1998)

Nishiyama H 等人：“在升高的温度下雄性生殖细胞中冷诱导的 RNA 结合蛋白 (CIRP) 的表达降低”Am J Path。

Tatsumi K et al: "Expression of calcium binding protein D-YK messenger RNA in the mouse uterine endometrium during implantation" Mol.Human Reprod. 5. 153-161 (1999)

Tatsumi K 等人：“植入期间小鼠子宫内膜中钙结合蛋白 D-YK 信使 RNA 的表达”Mol.Human Reprod。