糖脂質による細胞死抑制機構に関与する酵母遺伝子の解析

糖脂诱导细胞死亡抑制机制涉及的酵母基因分析

• 批准号: 11121219
• 负责人: 小堤 保則
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11121219/
• 关键词: スフィンゴ脂質; スフィンゴシン; ISP-1; プロテインキナーゼ; GFP; 酵母; 細胞死; 免疫抑制物質

アポトーシス誘導型免疫抑制物質ISP-1の酵母に対する致死作用を回避する機構に糖脂質の関与が示唆されている。さらに、それに関連した遺伝子の単離にも成功している。そこで、この細胞死抑制機構の解析を以下の点から進めた。(1)細胞死抑制シグナルに関与する遺伝子SLI1の解析申請者らは、酵母の系を用いて複数のISP-1耐性遺伝子をクローニングし、これをSphingosine-Like Immunosuppressant resistant geneの頭文字をとってSLIと名付けた。そこで、これらの遺伝子のうち、最も耐性の強いSLI1についてGreen Fluorescent Proteinとの融合タンパク質も作製し細胞内局在を明らかにしたところ膜画分に局在している事が明らかになった。(2)細胞死抑制シグナルに関与する遺伝子SLI2の解析SLI2はセリンスレオニンキナーゼをコードする遺伝子であった。そこで、GFPとの融合タンパク質を作りその局在を見たところ細胞膜と、細胞質に存在していた。興味深いことに、スフィンゴ脂質の減少により、膜局在は見られなくなり、増加により、多くの融合タンパク質が、膜に移行した。さらに、SLI2の細胞内局在は、酵母のアクチンとの相同性が見られた。これらのことから、スフィンゴ脂質、さらにはSLI2の転写産物は細胞骨格の制御に関与している可能性が示唆された。

The mechanism for avoiding the lethal effect of ISP-1, an inducible immunosuppressive substance, on yeast is the relationship between carbohydrate and lipid. In the meantime, the relationship between the two parties has been successfully completed. The analysis of cell death inhibition mechanism is as follows: (1)The analysis of the Sphingosine-Like Immunosuppressive resistant gene SLI1 was performed by the applicant, yeast, and yeast strains. The most resistant SLI1 protein is the Green Fluorescent Protein, which is used to control the intracellular structure. (2)Cell death inhibition is related to gene SLI2 analysis SLI2 is related to gene expression. There is no such thing as a fusion between GFP and the cytoplasm. In addition, the membrane structure can be changed into a new type of membrane structure, such as a new type of membrane structure. In addition, SLI2 has the same identity as yeast in its intracellular structure. The possibility of controlling the cellular structure of SLI2 is demonstrated.

项目成果

Y.Sun et al.: "Sli2/Ypk1, a homologue of mammalian protein kinase SGK, is a downstream kinase in the sphingolipid-mediated signal pathway of yeast"Mol. Cell. Biol.. (in press). (2000)

Y.Sun 等人：“Sli2/Ypk1 是哺乳动物蛋白激酶 SGK 的同源物，是酵母鞘脂介导的信号通路中的下游激酶”Mol.

Y.Ma et al.: "Antitumor activity of mannan-binding protein in vivo as revealed by a virus expression system: Mannan-binding proteindependent cell-mediated cytotoxicity"Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96(2). 371-375 (1999)

Y.Ma 等人：“病毒表达系统揭示的甘露聚糖结合蛋白体内抗肿瘤活性：甘露聚糖结合蛋白依赖性细胞介导的细胞毒性”Proc。