小胞体ストレス応答に関与する膜キナーゼの解析

参与内质网应激反应的膜激酶分析

基本信息

  • 批准号:
    11153216
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.73万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

細胞に小胞体ストレス(グルコース飢餓、還元化など)がかかり小胞体内にunfolded proteinsが蓄積すると、BiPをはじめとする小胞体シャペロンが転写レベルで誘導される。この反応はUnfolded Protein Response(UPR)と呼ばれ、酵母からヒトに至るまで進化的に保存された細胞のホメオスタシスに関わる重要な応答である。出芽酵母UPR経路では、小胞体膜上のlre1pキナーゼがこのシグナル伝達に重要な役割を果たしている。lRE1遺伝子は酵母では1種であるが、動物細胞ホモログはα、β2種類見つかっている。私達は2種のホモログの生理機能を明らかにする目的で、Tet off誘導型transfectantsを取得しその解析を行った。UPR経路は、小胞体膜キナーゼの過剰発現によっても誘導することが可能であることがわかっている。そこでヒトhlRE1α及びhlRE1βの野生型、変異型(dominant negative)をそれぞれ誘導的に発現する安定なHeLa細胞を取得し、誘導後における小胞体ストレス応答について解析した。それぞれの細胞をTet offの培地に変えると、ヒトhlRE1の転写レベル、蛋白レベルでの誘導が認められ、誘導されたhlRE1蛋白質は主に小胞体・核膜に在局した。hlRE1αの発現は、小胞他シャペロンであるBiPの転写レベルでの誘導を起こしUPRに関わっていることを支持したが、hlRE1βの発現はBiPの誘導を起こさず、細胞のアポトシスを引き起こすことが明らかとなった。また活性化されるために自己リン酸化が必要であることも明らかとなった。この系を用いてhlRE1αとhlRE1βの生理作用の違いを明らかにしていく予定である。
Cell Somatic Starvation, Cell Regeneration, Cell Cell Somatic Starvation, Cell Regeneration, Cell Regeneration, Cell Somatic Starvation, Cell Regeneration, Cell Regeneration, This is an important response to the Unfolded Protein Response(UPR) and the preservation of cells from yeast to yeast. The budding yeast UPR pathway is very important for the development of cell membrane. 1 species of yeast, 1 species of animal cells, 2 species of α and βThe physiological functions of two kinds of Tet-off-inducible transfectants were analyzed. UPR pathway, cell membrane, cell membrane The wild-type and dominant-negative versions of hlRE1 α and hlRE1 β were isolated from stable HeLa cells and analyzed after induction. The cells were cultured in vitro, and hlRE1 protein was induced in vitro. The expression of hlRE1 α and the expression of hlRE1 β in cells are related to the induction of BiP and the induction of BiP in cells. It is necessary to activate the enzyme. The physiological function of hlRE1α and hlRE1β is different.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kimata,Y.: "Impairel proteasome function rescues thermosensitivity of yeast cells lacking the coatomer subunit ε-COP"J.Biol.Chem.. (印刷中). (2000)
Kimata, Y.:“蛋白酶体功能受损可挽救缺乏外壳亚基 ε-COP 的酵母细胞的热敏感性”J.Biol.Chem..(出版中)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kimata,Y.: "Mutation of the yeast ε-COP gene ANU2 causes abnormal nuclear morphology and defects in intracellular resicular transport"Cell Struct.Funct.. 24. 197-208 (1999)
Kimata, Y.:“酵母 ε-COP 基因 ANU2 的突变导致核形态异常和细胞内网状运输缺陷”Cell Struct.Funct.. 24. 197-208 (1999)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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