哺乳動物小胞体ストレス応答の分子機構の解明

阐明哺乳动物内质网应激反应的分子机制

• 批准号: 24248019
• 负责人: 河野 憲二
• 金额: $ 12.23万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24248019/
• 关键词: 小胞体ストレス; 特殊スプライシング; 一時的翻訳停止; 小腸杯細胞; ムチン産生; 小胞体ストレスセンサー

1小胞体膜上での特殊スプライシング機構の解析XBPluタンパク質の小胞体膜アンカーに必要なHR2領域に結合してくるタンパク質の単離と解析を試みた。XBPluタンパク質は生細胞内では安定ではなく、またあまり作られないタンパク質なので、その中でも合成量の多い3HA-XBPlu(L246A)mNLS(一時停止をせず、且つ核移行をしない変異型XBPIu)を用いて免疫共沈降してくる結合タンパク質の解析を行った。3HA-XBPlu(L246A)mNLSに結合してくる特異的なバンドを検出するのは難しかったが、このサンプルをすべて質量分析(LC/MS/MS)し、特徴的な結合タンパク質88個を検出した。しかしこのままでは解析するには数が多すぎるので、非特異的バンドを抑える工夫をしている。2寄生虫排除に関与するIRE1βの生理機能解析寄生虫感染時に分泌されるIL33投与により疑似感染状態を再現できることがわかったので、IL33投与による小腸杯細胞の形態変化に着目し野生型マウスとIRE1βKOマウスとで比較を行った。野生型マウスでは杯細胞の数と大きさが増加し、ムチン産生が高まるが、IREIβKOマウスでは変化は殆ど観察されなかった。小腸組織を電子顕微鏡観察したところ、KOマウスでは杯細胞の小胞体肥大化が観察され、ムチン産生に異常が生じていることが示唆された。今後はムチン産生に関し生化学的解析を加え、ムチン産生量、前駆体ムチンの小胞体内での凝集などを明らかにしたいと考えている。

1 the special equipment on the membrane of the small cell is used to analyze the XBPlu. It is necessary to combine the field of HR2 with the field of HR2 to analyze the isolation of the microsomal membrane. XBPlu was used to induce intracellular diazepam (diazepam), thiazepam (L246A) mNLS (one time stop and nuclear transfer to XBPIu), and to use co-immunoprecipitation assay combined with immunoassay to analyze the target DNA. 3HA-XBPlu (L246A) mNLS was used to analyze 88 real-time data sets of the real-time data analysis system (LC/MS/MS) in combination with the real-time data acquisition system of the special hospital. I don't know how to analyze the number of people who don't have a lot of money. I don't know if there are any special problems. 2Parasite exclusion IRE1 β physiological mechanism can be used to analyze the secretion of parasite infection and suspected infection status of parasite IL33 and suspected infection. The results showed that the morphology of wild type animal IRE1 β Koch cell was significantly higher than that of the wild type virus. The number of cells in the wild type was higher than that in the wild type, and the number of cells in the wild type was significantly higher than that in the wild type. the number of cells in the wild type was significantly higher than that in the wild type. Small organizations such as computer microscopes, KO microcomputers, microcytopathic hypertrophy cells, microsomal hypertrophy cells, microcytopathic cells, microphones, microcomputers, microphones, microcomputers, microphones In the future, the analysis of biochemistry, the amount of growth, the amount of progenitor, the agglutination of microcysts, the analysis of biochemistry, the amount of growth, the amount of progenitor, and the agglutination of small cells in the future.

项目成果

生物のストレス解消システムとその破綻による疾患

生物体的压力缓解系统及其崩溃引起的疾病

• 作者: 高橋晴美;グプルジャン・ゲニ;清野 進;西垣智弘，杉原創，キラサラメソッド，舟川晋也．;河野憲二
• 通讯作者: 河野憲二

Membrane aberrancy and funfolded proteins activate the endoplasmic reticulum-stress sensor Irel by different manners.

膜异常和折叠蛋白通过不同方式激活内质网应激传感器 Irel。

• 发表时间: 2012
• 作者: Kenji Kohno;Yukio Kimata
• 通讯作者: Yukio Kimata

Invention and application of the super-pausing sequence for translation.

翻译超暂停序列的发明及应用。

• 发表时间: 2012
• 作者: Kenji Kohno;Yukio Kimata;Ashuei Sogawa
• 通讯作者: Ashuei Sogawa

Ribosomal stalling promotes XBP1u mRNA splicing upon ER stress.

核糖体停滞促进 ER 应激时 XBP1u mRNA 剪接。

• 作者: Kohno;Kenji
• 通讯作者: Kenji

Ribosome pausing promotes XBP1 mRNA unconventional splicing upon ER stress.

核糖体暂停促进 XBP1 mRNA 在 ER 应激下的非常规剪接。

• 作者: Kohno;Kenji
• 通讯作者: Kenji