酵母変異株による株輸送及び核構築機構の分子遺伝学的解析

酵母突变体菌株运输和核组装机制的分子遗传学分析

• 批准号: 08274212
• 负责人: 河野 憲二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274212/
• 关键词: 核輸送; 核構造; 酵母変異株; GFP

アフリカツメガエル由来のヌクレオプラスミンを核蛋白質輸送に関するマーカーとし、出芽酵母から核輸送に関する温度感受性変異株のスクリーニングを行った。その結果NUP133と共同し核輸送を阻害する新規変異株SNO1を得た。nup133やsno1単独変異株では核輸送の阻害は殆ど認められないが、両者の2重変異株では核への輸送が著しく阻害される。またNUP133遺伝子破壊株とsno1変異株はどちらも30℃では正常に増殖するのに対し、その2重変異株は30℃では増殖できない。これらのことから、NUP133とSNO1の遺伝学的関連性が示唆されたので、SNO1遺伝子のクローニングを行った。SNO1は336個のアミノ酸からなる全く新規の遺伝子で、既存の蛋白とのホモロジーは現在までのところ見つかっていない。また遺伝子ノックアウトの結果から、生育に必須の遺伝子であることが明らかとなった。また、核の構造や機能を理解する目的で、GFP-ヌクレオプラスミンの融合蛋白を核蛋白マーカーとし、核形態異常を示す変異株のスクリーニングを行い、核の断片化を起こす高温感受性変異株、anu1とanu2を取得した。ANU1,ANU2とも新規遺伝子であり、少なくともANU1遺伝子は増殖にとり必須な遺伝子であった。ANU1にはホモログが存在しており、ヒトにもホモログがあることから細胞の生育にとり重要な役割をになっていると考えられる。現在これらの変異株の生理機能の解析を進めている。

ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル origin の ヌ ク レ オ プ ラ ス ミ ン を nuclear protein transport に masato す る マ ー カ ー と し, budding yeast か ら nuclear transport に masato す る temperature sensitivity - different strains の ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た. Youdaoplaceholder0 そ results NUP133と co-nuclear transport を damage control する new regulation variant SNO1を た. Nup133 や sno1 単 alone - different strains で は nuclear transport の resistance against は perilous ど recognize め ら れ な い が, struck の heavy - 2 different strains で は nuclear へ の conveying が the し く resistance against さ れ る. ま た NUP133 heritage 伝 son broken 壊 strains と sno1 - different strains は ど ち ら も 30 ℃ で す は normal に raised colonization る の に し, seaborne そ の 2 heavy - different strains は 30 ℃ で は raised colonization で き な い. こ れ ら の こ と か ら, NUP133 と SNO1 の but 伝 learn masato even sex が in stopping さ れ た の で, SNO1 but 伝 の ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. 336 の SNO1 は ア ミ ノ acid か ら な る く all new rules の heritage 伝 で, existing の protein と の ホ モ ロ ジ ー は now ま で の と こ ろ see つ か っ て い な い. ま た posthumous son 伝 ノ ッ ク ア ウ ト の results か ら, birth に must の heritage 伝 son で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た や, nuclear の structure function を understand す る purpose で, GFP - ヌ ク レ オ プ ラ ス ミ ン の fusion protein を nucleoprotein マ ー カ ー と し, nuclear form abnormal を す - different strains の ス ク リ ー ニ ン グ を line い, nuclear の fragment を up こ す high temperature sensitivity - different strains, anu1 と anu2 を obtain し た. ANU1, ANU2 と も new rules but 伝 son で あ り, less な く と も ANU1 posthumous son 伝 は raised colonization に と り must な heritage 伝 son で あ っ た. ANU1 に は ホ モ ロ グ が exist し て お り, ヒ ト に も ホ モ ロ グ が あ る こ と か ら cells の fertility に と り important cut を な service に な っ て い る と exam え ら れ る. Now the analysis of the <s:1> physiological functions <e:1> of the <s:1> mutant strain を goes into めて る る る.

项目成果

M.Oka: "Saccharomyces cerevisiae KAR2(BiP)gene expression is induced by loss of cytosolic HSP70/Ssalp through a heat shock eloment-mediated pathway" J.Biochemistry. 121. 578-584 (1997)

M.Oka：“酿酒酵母 KAR2(BiP) 基因表达是通过热休克 eloment 介导的途径通过胞质 HSP70/Ssalp 的损失而诱导的”J.Biochemistry。

木俣 行雄: "GFPとの融合による蛋白質細胞内局在の可視化" 実験医学. 15. 563-567 (1997)

Yukio Kimata：“通过与 GFP 融合实现蛋白质亚细胞定位的可视化”实验医学 15. 563-567 (1997)。

Y.Kimata: "A novel mutation which enhances the fluorescence of green fluorescent protein at high temperature" Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press). (1997)

Y.Kimata：“一种在高温下增强绿色荧光蛋白荧光的新突变”Biochem.Biophys.Res.Commun.（正在出版）。

木俣 行雄: "核への蛋白質輸送の研究" 蛋白質核酸酵素. 42(印刷中). (1997)

Yukio Kimata：“蛋白质转运至细胞核的研究”蛋白质核酸酶 42（出版中）。