ホスファチジン酸ホスファターゼの新しい機能と作用分子機構の解明

阐明磷脂酸磷酸酶的新功能和分子作用机制

• 批准号: 10212207
• 负责人: 加納 英雄
• 金额: $ 20.42万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10212207/
• 关键词: ホスファチジン酸; ジアシルグリセロール; シグナル伝達; リン脂質; ホスファターゼ; ジアシルグソセロール; ホスファチジン酸ホスファターゼ; 遺伝子ターゲッティング

ヒトPAP-2aはTritonX-100可溶性であるが、CHAPS不溶性のラフトに存在することが分かった。一方、PAP-2bはTritonX-100不溶性であり、約50%がカベオラに存在する。2種のPAPのGolgi体から表面膜への輸送過程を検討した結果、2a,2b両者を含む小胞と、2bのみを含む小胞が観察された。2a,2bの小胞輸送系に相違があることを示している。ドメインスワッピングの結果、2bの最初の細胞外ループがTritonX-100不溶性のために必須であることが分かった。2a,2b両者を安定発現するMDCK細胞株を樹立し、発現した酵素の細胞内局在性を調べた。PAP-2aの90%がapicalドメインに、またPAP-2bの70%がbasolateral側に、それぞれ分離して分布していた。ドメインスワッピング実験の結果、PAP-2aのapicalシグナルはF(2)DKTRL(7)のN端6残基と確定した。この配列はPDZ-結合配列であるが、タンパクのN-端に存在する初めての例である。一方、PAP-2bのbasolateralシグナルは第一番目の細胞側ループに存在するtyrosine-rich motifであることを確認できた。

PAP-2a is soluble in TritonX-100 and insoluble in CHAPS. One side, PAP-2b is insoluble in Triton X-100, about 50% of which is present. The transport process of two kinds of PAP Golgi was studied. The results of 2a,2b and 2c were analyzed. 2a,2b cell transport systems are in conflict. The results of Triton X-100 were as follows: 2a,2b, 2c, 2d, 2d, 2 PAP-2a is 90% apical, PAP-2b is 70% basolateral, and PAP-2b is isolated. The apical structure of PAP-2a was determined by the N-terminal residue 6 of F(2)DKTRL(7). This arrangement is PDZ-bound and exists at the N-terminal. The presence of a tyrosine rich motif in the cellular side of a protein, PAP-2b, is confirmed.

项目成果

Jiang, Ying: "Selecturity of the dialylglycesol kinase in hibitor, R59949 among diacylglycerol kenies subtypes"Biochem. Phoimacol. (印刷中).

蒋英：“二酰基甘油激酶亚型中二酰基甘油激酶的选择性”（正在出版）。

加納、英雄: "ホスファチジン酸ホスファターゼ" 蛋白質核酸酵素. 印刷中. (1999)

Kano，Hideo：“磷脂酸磷酸酶”，蛋白质核酸酶，出版中（1999 年）。

Kanoh,Hideo: "Molecular characterization of the type 2 phosphatidic acid phosphatase"Chem.Phys.Lipids.. 98. 983-988 (1999)

Kanoh，Hideo：“2 型磷脂酸磷酸酶的分子特征”Chem.Phys.Lipids.. 98. 983-988 (1999)

Hisao, Nagaya: "Diacylglycerol kinases supprisses ER-to-golgi traffic via its SAM and PH domains"Mol.Biol.Cell. 13. 302-316 (2002)

Hisao, Nagaya：“二酰基甘油激酶通过其 SAM 和 PH 结构域抑制 ER 到高尔基体的运输”Mol.Biol.Cell。

Ishikawa,Tadataka: "Cell surface activity of the human type 2b phosphatidic acid phosphatase"J.Biochem.. 127. 645-651 (2000)

石川忠敬：“人 2b 型磷脂酸磷酸酶的细胞表面活性”J.Biochem.. 127. 645-651 (2000)