染色体組換え点遺伝子の異常による発生異常及び疾患のモデルマウスの開発と遺伝子解析

发育异常和染色体重组点基因异常引起的疾病小鼠模型的建立和遗传分析

• 批准号: 12024234
• 负责人: 孫田 信一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12024234/
• 关键词: 相互転座; 切断点; ゲノムライブラリー; 発達障害; 発生異常; 構造異常; ホモ接合体

相互転座などの均衡型染色体構造異常を有し、そのホモ接合体やヘテロ接合体で各種疾患、発生異常、器官形成異常などを呈する系統を多数開発し、各種異常にそれぞれ関与する切断点遺伝子を探索するシステムの確立を目指した。まず、4.5シーベルトのX線照射雄との交配で得られる子獣では29.8%に染色体構造異常が見られ、そのホモ(またはヘテロ)接合体の中からこれまで種々の症状(発育障害、四肢形成異常、腎異形成、痙撃発作、行動異常、高発癌、早発老化、学習記憶障害など)を呈する12系統を分離した。構造異常を有する他の系統の約20.8%はホモ接合体で致死となり、2〜8細胞期を含む初期段階での発生停止、着床後早期の発生異常、器官形成異常などを示した。一方、マウス(およびチャイニーズハムスター)のDNAを用いて、定法によりゲノムライブラリーを作製し、マウスおよびハムスターゲノム由来の500以上のBAC及びコスミドクローンをFISH法で染色体上にマッピングした。さらに、相互転座ホモ接合体で発育障害と学習記憶障害を示す2系統、及び染色体13と16の相互転座ホモ接合体で特有の発生異常、器官形成異常を示す1系統のマウスを用いて、切断点遺伝子の解析を試みた。後者の切断点におけるBAC contigのFISH解析の結果、特定クローンが染色体16の切断点を挟むことが判明したので、遺伝子の分離と解析を図った。ホモ接合体で発育障害と学習記憶障害を示す2系統の遺伝子はかなり狭い範囲に特定したが、遺伝子決定には至っていない。マウス遺伝子から相同性を利用して同一機能のヒト遺伝子を特定することが容易になっている。染色体構造異常と各種症状や発生異常等を伴う動物系統について胚バンクとして系統的に保存していくならば、未知の遺伝子を含む多数の遺伝子の構造・機能の解析の有用な研究材料になるものと考える。

Mutual planning a な ど の equilibrium type of abnormal chromosome structure を し, そ の ホ モ gametes や ヘ テ ロ gametes で various disorders, 発 raw, an abnormal organ formation な ど を show す る system を most open 発 し, all kinds of abnormal に そ れ ぞ れ masato and す る cutoff point heritage 伝 son を explore す る シ ス テ ム の establish を refers し た. ま ず, 4.5 シ ー ベ ル ト の X-ray irradiation male と の mating で have ら れ る son 獣 で は 29.8% に chromosome structural abnormalities が see ら れ, そ の ホ モ (ま た は ヘ テ ロ) gametes in の か ら こ れ ま で kind 々 の symptoms (発 nurtures the handicap, limb painful shock on the abnormal formation, kidney different formation, 発, abnormal action, high 発 発 cancer, early ageing, learning and memory handicap of な Youdaoplaceholder2)を in する12 system を separation た た. Structural abnormalities を have す る の he の system about 20.8% は ホ モ gametes で death と な り early, 2 ~ 8 cell stage を む Duan Jie で の 発 stop, after implantation early の 発 raw, an abnormal organ formation な ど を shown し た. Party, マ ウ ス (お よ び チ ャ イ ニ ー ズ ハ ム ス タ ー) の を DNA with い て, fixed に よ り ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ ー を as し, マ ウ ス お よ び ハ ム ス タ ー ゲ ノ ム origin の above 500 の BAC and び コ ス ミ ド ク ロ ー ン を で FISH method on chromosome に マ ッ ピ ン グ し た. さ ら に, mutual planning ホ モ gametes で 発 nurtures the handicap of と handicap of learning and memory を す 2 system, and び chromosome 13 と 16 の mutual planning ホ モ gametes で の unique 発 with 1, an abnormal organ formation を shown す system の マ ウ ス を with い て, cutoff point but 伝 の parsing を try み た. The latter の cutoff point に お け る BAC contig の FISH analytical の results, specific ク ロ ー ン が chromosome 16 の cutoff point を carry む こ と が.at し た の で separation, but 伝 の と parsing を 図 っ た. ホ モ gametes で 発 nurtures the handicap of と handicap of learning and memory を す 2 system in の heritage 伝 son は か な り narrow い van 囲 に specific し た が, but 伝 decided に は to っ て い な い. マ ウ ス posthumous son 伝 か ら identity を using し て same function の ヒ ト posthumous son 伝 を specific す る こ と が easy に な っ て い る. Abnormal chromosome structure abnormal symptoms と や 発 raw を う animal tracing system, such as に つ い て embryo バ ン ク と し て system に save し て い く な ら ば, unknown の but 伝 を including む most の heritage 伝 son の structure, function analytical の の な useful research materials に な る も の と exam え る.

项目成果

Ono,T.,Hirano,S.,Yonezawa,S.,Aono,S.,Osaki,M.,Sonta,S. et al.: "Comparative mapping of seven genes in mouse, rat and Chinese hamster chromosomes by fluorescence in situ hybridization"Cytogenet.Cell Genet.. 89. 209-213 (2000)

小野，T.，平野，S.，米泽，S.，青野，S.，大崎，M.，桑太，S.

Aono,S.,Keino,H.,Ono,T.,Yasuda,Y.,Sonta,S. et al.: "Genomic organization and expression pattern of mouse neuroglycan C in the cerebellar development"J.Biol.Chem.. 275. 337-342 (2000)

青野，S.，庆野，H.，小野，T.，安田，Y.，桑太，S.

Tetsuka,T.,Uranishi,H.,Ono,T.,Sonta,S. et al.: "Inhibition of nuclear factor-kappaB-mediated transcription by association with the amino-terminal enhancer of split, a Groucho-related protein lacking WD40 repeats"J.Biol.Chem.. 275. 4383-4390 (2000)

Tetsuka,T.,Uranishi,H.,小野,T.,Sonta,S.