リボソームGTPaseセンターにおけるrRNAとタンパク質の機能的相互作用

核糖体 GTP 酶中心 rRNA 和蛋白质的功能相互作用

• 批准号: 12029211
• 负责人: 内海 利男
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12029211/
• 关键词: リボソーム; リボソームRNA; リボソームタンパク質; L7; L12; GTPase; RNA-タンパク質相互作用; リボソームStalk; ペプチド鎖伸長因子

タンパク質生合成の速度と精度はリボソーム上の特定部位におけるGTP水解反応に依存している。これまでの本研究により、このGTP水解反応にリボソームRNA中の"GTPaseドメイン"とリボソームstalkタンパク質成分の結合が不可欠であることを示してきた。しかし、リボソーム粒子中に複数コピー存在するStalkタンパク質の機能面の意味は、なお、明確にされていない。本年度は、大腸菌リボソーム中に4コピー存在するL7/L12Stalkタンパク質のコピー数とGTPase活性の関係を生化学的に解析し、以下のような知見を得た。1)L7/L12タンパク質を2コピー含むリボソームは野性型リボソームの50%のGTPase活性を示すL7/L12の4コピーが結合するL10側に変異を導入することにより、2コピーのL7/L12を結合するリボソームの調製に成功し、得られたリボソームの機能解析を行った。2)L7/L12を1コピーしか含まないリボソームは野性型の20%のGTPase活性を示す L7/L12側に変異を導入することにより、1コピーのL7/L12しか含まないリボソームが得られ、その機能解析を行った。1)と2)の解析により、L7/L12の4コピーはリボソーム機能にとって必ずしも全て必要ではなく、コピー数はL10を介するrRNA結合性とそれによるrRNAの機能制御と関係することが示唆された。

The speed and accuracy of mass production depends on the specific position of GTP hydrolysis. In this study, the GTP hydrolysis reaction was shown to be a "GTase" and a "stalkase" in RNA. The meaning of the functional surface of the substance of a plurality of particles in a clear and transparent manner is clear. This year, the biochemical analysis of the relationship between L7/L12Stalk number and GTase activity in E. coli was conducted. 1)L7/L12: 2:4:5: 50% GTase activity in wild type: 2:5: 50% GTase activity in wild type: 2:5: 50% GTase activity in wild type: 2: 50% GTase activity in wild type 2)L7/L12 1 ° C +1 ° C +1 ° C +1 °1) Analysis of rRNA binding properties and functional control relationships between L7/L12 and L10.

项目成果

石川冬木 他: "RNA研究の最前線"シュプリンガー・フェアラーク東京. 238 (2000)

Fuyuki Ishikawa 等人：“RNA 研究的前沿”Springer-Verlag Tokyo 238 (2000)。

Anderson,C.J. et al.: "Autoantibodies to the 20-kDa Ribosomal Proteins : Identification, Characterization, and New Aspects on Prevalence in Systemic Lupus Erythematosus."Clinical Immunol.. 98. 249-253 (2001)

安德森，C.J.

Uchiumi, T. et al.: "A covariant change of the two highly conserved bases in the GTPase-associated center of 28 S rRNA in silkworms and other moths"J. Biol. Chem. 275. 35116-35121 (2000)

Uchiumi, T. 等人：“蚕和其他飞蛾中 28 S rRNA 的 GTP 酶相关中心的两个高度保守碱基的协变变化”J.

内海利男: "リボソームの機能部位が見えてきた:X線結晶解析が示す翻訳装置の構造."蛋白質・核酸・酵素. 45. 1237-1244 (2000)

Toshio Utsumi：“核糖体的功能位点已被揭示：X 射线晶体学揭示的翻译装置的结构。” 45. 1237-1244 (2000)。