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リボソームGTPaseセンターにおけるrRNAとタンパク質の機能的相互作用

核糖体 GTP 酶中心 rRNA 和蛋白质的功能相互作用

基本信息

批准号：
11155212
负责人：
内海利男
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質生合成の速度と精度はリボソーム上の特定部位におけるGTP水解反応に依存している。この反応に、リボソームRNA中の"GTPaseドメイン"と"毒素ドメイン"と呼ばれる二つの部位とリボソームstalkタンパク質成分の関わることが示されてきたが、リボソーム粒子中におけるこれらの協調性の分子機構は明確にされていない。本年度は、動物細胞から調製されたリボソームStalkタンパク質複合体(Pタンパク質複合体)を使用した生化学的解析により、以下のように、このタンパク質が二つのRNA機能部位と密接な関係にあることを明らかにした。1)ラットPタンパク質複合体は大腸菌rRNAのGTPaseドメインに結合し、機能を誘発する Footprint法により、ラットPタンパク質複合体が大腸菌リボソーム中のGTPaseドメインに結合する部位を同定し、それに伴いリボソーム機能(GTP水解と、poly(Phe)合成)が動物細胞の翻訳因子依存型に変換することを明確に示した。2)大腸菌rRNAのGTPaseドメインへのラットリボソームタンパク質の結合は毒素ドメインの構造を変化させる大腸菌rRNAのGTPaseドメインに結合するラットPタンパク質複合体の結合により、真核生物のリボソームにしか作用しない毒素、ペポシンを受容し、毒素ドメイン(2660部位)のアデニン塩基の遊離を受けること、またその結果、動物型に変化したリボソーム活性も抑制されることを示した。

The speed and accuracy of mass production depends on the specific position of GTP hydrolysis. The "GTase" and "toxin" in the anti-virus RNA and the "toxin" in the anti-virus RNA are clearly defined. This year, animal cells have been modified to use biochemical analysis of the protein complex, and the relationship between the protein and RNA functional sites has been clarified. 1) Identification of the binding sites of E. coli rRNA to GTase protein and functional induction of the protein complex by Footprint method, identification of the binding sites of E. coli rRNA to GTase protein and functional induction of the protein complex (GTP hydrolysis, poly(Phe) synthesis), and identification of the transcription factor-dependent transformation of animal cells. 2)Escherichia coli rRNA GTase protein binding protein structure change, Escherichia coli rRNA GTase protein binding protein complex, eukaryotic rRNA protein binding protein, eukaryotic rRNA protein binding protein The animal model was developed to inhibit the activity of the enzyme.