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リボソームRNAの機能構造を誘発するタンパク質結合

蛋白质结合诱导核糖体 RNA 的功能结构

基本信息

批准号：
08670141
负责人：
内海利男
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

リボソームRNAの機能構造を誘発するリボソームタンパク質結合の一例として、リボソームのGTPs水解活性に関わるGTPaseRNAドメインとタンパク質の結合機構を解析し、次のような点が明らかとなった。1)GTPaseRNAドメインに結合するラット肝リボソームタンパク質とその結合部位ラット肝リボソームから調整・精製したPO,P1,P2タンパク質はin vitroで複合体を形成し(P-複合体)、それにより初めてGTPaseRNAドメインに強く結合した。別なリボソームタンパク質L12タンパク質もGTPaseRNAドメインに結合し、この結合はP-複合体の結合と協調的であった。Footprint法によりRNA上のタンパク質結合部位を解析したところ、P-複合体の結合により28SrRNAの1855-1861残基と1920-1922残基より成るinternal loop部位の化学修飾が保護され、またL12の結合により、1867-1878残基と1877-1899残基より成るヘリックス部分が保護され、それぞれの結合部位としてGTPaseRNAドメイン上にマップされた。これらの結合部位は以前報告した抗28SRNA抗体の結合部位[EMBOJ.(1994)]の近傍であるが明らかに異なっていた。2)リボソームタンパク質の結合による抗28SRNA抗体受容性の促進 P-複合体およびL12タンパク質の結合により、GTPaseRNAドメインの機能構造を認識する抗28SRNA抗体の親和性が2-4倍増強されることが判明した。この結果は、リボソームタンパク質の各部位への結合によってGTPaseRNAドメインの高次構造が微妙に調整を受け、その構造が安定化することを示唆している。これらの結果より、GTP水解反応に関与するrRNAドメインの機能構造はリボソームタンパク質P0,P1,P2およびL12タンパク質の結合により誘発されることが示された。また、以前の抗28S抗体のエピトープ解析の結果[EMBOJ.(1994)]と合わせ、誘発される高次構造のモデルを提出、発表した。

The RNA machine was able to make an example of the combination of the information and the activity of the hydrolytic GTPs. The GTPaseRNA was analyzed by the combination of the mechanical analysis and the secondary analysis. 1) the combination of the GTPaseRNA gene and the GTPaseRNA gene was performed in the joint of the liver, the liver, the liver Please do not use the combination of L12, L12, GTPaseRNA, or P-complex to combine the coordination protocol. The analysis of the binding site of the antigens on the RNA by Footprint method, the combination of the 28SrRNA 1855-1861 residue 1920-1922 residue into the internal loop site, the chemical repair of the internal loop site, the L12 binding site, the 1867-1878 residue 1877-1899 residue and the binding site. In the joint part of the GTPaseRNA joint, there is a lot of noise on the joint. The anti-28SRNA antibody binding site [EMBOJ. (1994)] was previously reported. 2) the combination of anti-28SRNA antibodies and the capacitive detection of anti-28SRNA antibodies can promote the detection of anti-28SRNA antibodies and the detection of anti-28SRNA antibodies 2-4 times stronger. The results show that all parts of the body are affected by the combination of the GTPaseRNA signal, the subtlety of the receiver, and the stabilization of the target. The results of the experiments, the GTP hydrolytic reverse reaction and the detection of rRNA reactionaries were performed by the combination of the P0, P2, P2, L12, and reactions. the results were as follows: the results of the experiments, the results of the results, the results of The results of the previous anti-28s antibody test analysis [EMBOJ. (1994)] were compared with those of the previous anti-28s antibody.