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遺伝子発現の量的差違を指標とした、新規病態解析、診断法の確立に関する研究

以基因表达量差异为指标建立新的病理分析和诊断方法的研究

基本信息

批准号：
12204114
负责人：
村上善則
金额：
--
依托单位：
National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12204114/
关键词：
アレル特異的発現遺伝子診断 c-myc遺伝子本態性高血圧症

项目摘要

遺伝性疾患の保因者診断における障壁の一つは、遺伝子産物の構造異常を伴わず、その発現欠如や低下が原因と考えられる症例が相当数存在し、現行の方法では診断できないことである。そこで、我々は遺伝子コード領域の多型(cSNP)を活用し、種々の病態を、原因遺伝子の発現の量的差異、特に発現の誘導や抑制に対する動的変化の差異の見地から解析する方法として、RNA Difference Plot(RDP)法を確立した。すなわち、多型を示すゲノムDNA、並びにmRNAから得たcDNAの同一断片を、蛍光標識プライマーを用いてPCRによりそれぞれ増幅し、塩基配列自動解析装置を用いたSSCP解析により分離し、各増幅産物の量比を測定した。そしてアレル特異的な遺伝子発現量を、PCR反応のサイクル数に依存せず、高い感度で定量することができること、二つのアレルからの発現量の比に関する結果が標準偏差10%以内で測定できることを示した。次にRDP法を用いることにより、c-myc遺伝子の両アレルからの発現量が、健常人の正常リンパ球では、正確に等量であることを示した。この量比は、細胞に血清刺激を与えて、c-myc遺伝子の発現を4倍程度まで誘導しても変化しなかった。このようにRDP法は、アレル特異的な遺伝子発現の高度定量的解析を可能とし、方法が簡便であり、しかもcSNPを示すあらゆる遺伝子が解析可能である等の特長をもつ。従ってRDP解析は、本態性高血圧症等、種々の生活習慣病の原因遺伝子や候補遺伝子の同定、病態解析、保因者診断等に応用可能である。今後個々の症例について発現の誘導や抑制に対する動的変化を含めて検討していく予定である。

Those who protect the cause of sexual disorders do not know that there are many cases of sexual disease, and that there are quite a number of cases of sexual disease. the causes of sexual disorders are not as low as low causes, and there are quite a number of cases. This is the standard for the active use of cSNP, the status of disease, the difference in the amount of causative agents, the special guidance for the suppression of disease activity, and the identification of RNA Difference Plot (RDP) methods. The device is used to analyze the data, the multi-type display is used to display the DNA, and the mRNA is used to detect the same fragment, the light-emitting device is used to measure the amplitude of the PCR, the base-equipped automatic analytical device is used to analyze the data by SSCP, and the weight of each piece is measured. The results show that the measurement error is within 10% of the standard deviation of the standard deviation of 10% of the standard deviation of 10% of the standard deviation of the standard deviation of 10% of the standard deviation of the standard deviation of 10% of the standard deviation of the results, the results show that the data is not more than 10% of the standard deviation, the PCR is sensitive, the sensitivity is high, and the sensitivity is high. In the secondary RDP method, you can use the following methods: normal people, normal people, normal The dose ratio, serum stimulation and c-myc serum stimulation were 4 times higher than that of the control group. There is a high degree of quantitative analysis in the RDP method, in the system, and in the analysis of the specialty. it is possible to analyze the data in a highly quantitative manner, and the cSNP indicates that it is possible to analyze the data and other special features. It is possible to use different drugs such as RDP analysis, idiopathic hyperemia, etiology, etiology, etiology analysis, cause protection, and so on. In the next case of SARS, it is necessary to guide the suppression of health care activities, including pre-planned training programs.