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酵母人工染色体移入等、生物学的検定法による肺非小細胞癌抑制遺伝子単離に関する研究

利用酵母人工染色体转移等生物检测方法分离肺癌非小细胞癌抑制基因的研究

基本信息

批准号：
09254272
负责人：
村上善則
金额：
$ 2.05万
依托单位：
National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

第11染色体長腕q23領域に存在するヒト肺非小細胞がん抑制遺伝子の単離を目的として、以下の解析結果を得た。1.この領域に存在する酵母人工染色体(YAC)クローンを、ヒト、並びにマウス肺非小細胞がん細胞A549,LLCに導入することにより、1つのYACにクローン化された約1.6メガ塩基対の断片内に腫瘍原性を抑制する活性が存在することを確認した。2.このYACクローンを断片化し、同様の解析をA549細胞を用いて行うことにより、約800キロ塩基対の断片内にがん抑制活性が存在することを見出した。3.この約800キロ塩基対の領域が、手術摘出肺がん組織DNAにおいてヘテロ接合性の消失(LOH)を示す最小共通領域と重複することを明らかにした。4.この領域を網羅する、連続した細菌人工染色体(BAC)並びにファージ人工染色体(PAC)クローンを得た。5.この領域に存在する候補遺伝子の一つをクローニングした。また、第5染色体長腕領域に存在する肺小細胞がん抑制遺伝子の単離を目的として、以下の解析結果を得た。1.ヒト肺小細胞がん培養細胞の2例で、この領域の一部のホモ欠失を見出した。2.ホモ欠失領域を、一つのYACにクローン化された断片内に限定した。3.ホモ欠失領域を網羅する連続したBACクローンを得た。

The results of the following analysis were obtained for the purpose of detecting the presence of a long chromosome q23 in lung non-small cells. 1. The presence of yeast artificial chromosome (YAC) in this domain is confirmed by the introduction of YAC into non-small cell A549,LLC. 2. The YAC gene fragment was analyzed and the inhibitory activity was observed in A549 cells. 3. About 800 percent of lung tissue DNA was extracted and the loss of conjugality (LOH) was shown to be the smallest common domain. 4. This domain includes bacterial artificial chromosomes (BAC) and artificial chromosomes (PAC). 5. There are candidates in this field. In addition, the following analysis results were obtained based on the isolation of inhibitory genes in small lung cells present in the long wrist region of chromosome 5. 1. Two cases of lung small cells in culture were found, and part of the field was missing. 2. The missing area is limited by the YAC. 3. The missing area is connected to the BAC network.