酵母人工染色体クローン操作等、新しい方法による未知がん抑制遺伝子の単離と解析

利用酵母人工染色体克隆等新方法分离和分析未知抑癌基因

• 批准号: 10152265
• 负责人: 村上 善則
• 金额: $ 7.68万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152265/
• 关键词: 肺非小細胞がん; がん抑制遺伝子; 第11染色体長腕; 酵母人工染色体; スフェロプラスト融合法

第11染色体q23領域に存在するヒト肺非小細胞がん(NSCLC)抑制遺伝子を単離する目的で、酵母人工染色体(YAC)クローンをヒトNSCLC細胞A549に導入し、ヌードマウス皮下の腫瘍原性の抑制を指標として遺伝子座位を100kbに退局化し、新規候補遺伝子TSLC1/IGSF4cDNAを単離した。この遺伝子は一回膜貫通ドメインをもつ糖蛋白質をコードし免疫globulin superfamily、特に神経細胞接着因子(NCAM)と構造類似性を示す。この遺伝子に関して、以下の知見を得た。(1)検索したすべての組織で発現を認めたが、A549を含むNSCLC培養細胞12例中8例ではmRNAの欠如、ないし著明低下を認めた。またヒトNSCLC腫瘍で高頻度にLOHを示した。(2)全長cDNAをNSCLC細胞A549に導入すると、正常肺組織相当の発現量で腫瘍原性が抑制された。(3)N端のシグナルペプチドを欠如し、細胞膜に局在しない分子は腫瘍抑制活性を示さなかった。(4)遺伝子産物が細胞膜、並びに核周辺の膜構造に局在し、糖鎖附加を受けることを実験的に示した。以上の知見により、TSLC1/GSF4は新規肺非小細胞がん抑制遺伝子であると結論した。さらに肺がん以外の様々なヒトのがんにも関与することを示唆する知見が得られている。

Chromosome 11 に q23 field exist す る ヒ ト non-small cell lung が ん (NSCLC) inhibition of heritage 伝 son を 単 from す で る purpose, yeast artificial chromosome (YAC) ク ロ ー ン を ヒ ト NSCLC A549 cells に import し, ヌ ー ド マ ウ ス subcutaneous の swollen sores original の inhibit を index と し て heritage 伝 child seat を refund bureau 100 KB に し, The new rule candidate 伝 subcarrier TSLC1/IGSF4cDNAを単 is separated from た. こ の posthumous son 伝 は once transmembrane ド メ イ ン を も つ sugar protein を コ ー ド し immune globulin superfamily, に 経 cells then god factor (NCAM) と structure similarity を す. The に cultural heritage 伝 is related to に. The following is the knowledge of を and た. (1) 検 cable し た す べ て の organization で 発 を now recognize め た が, A549 を containing む 12 cases, 8 cases of NSCLC culture cell で は mRNA の owe such as, な い し zhao Ming low を recognize め た. Youdaoplaceholder0 NSCLC abscess で high-frequency にLOHを shows た た. (2) The full-length cDNAをNSCLC cells A549に were introduced into すると, and the corresponding amount of で abscisiogenic が inhibition was achieved in normal lung tissue された. (3) The n-terminal <s:1> シグナ ペプチドを ペプチドを ペプチドを is lacking in the inhibitory activity of <s:1> and the cell membrane に in the <s:1> な シグナ molecules, which indicates さな さな った った. (4) the legacy of the latter's 伝 が cell membranes, and び に nuclear weeks 辺 の membrane structure に bureau in additional を し, sugar lock け る こ と を be 験 に し in た. The above opinions are によ によ, the new regulation of TSLC1/GSF4 <s:1> inhibition of pulmonary non-small cells がん remains 伝 であると, and the conclusion is た た. さ ら に lung が ん outside の others 々 な ヒ ト の が ん に も masato and す る こ と を in stopping す る knowledge が have ら れ て い る.

项目成果

Kuchiki, H, Murakami, Y.et al.: "Detection of amplification of a chromosomal fragment at 6p21 including the Cyclin D3 gene in a glioblastoma cell line by arbitrarily primed polymerase chain reaction"Int. J Cancer. 85. 113-116 (2000)

Kuchiki, H, Murakami, Y.等人：“通过任意引发的聚合酶链反应检测胶质母细胞瘤细胞系中 6p21 处染色体片段的扩增，包括细胞周期蛋白 D3 基因”Int。

Murakami,Y.& Sekiya,T.: "Accumulation of genetic alterations and their significance in each primary human cancer and cell line" Mutation Resarch. 400. 421-437 (1998)

村上，Y.

Murakami,Y.et al.: "Localization of Tumor Suppressor Activity Important in Non Small Cell Lung Carcinoma on Chromosome 11q" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 8153-8158 (1998)

Murakami,Y.et al.：“在非小细胞肺癌中重要的肿瘤抑制活性在染色体 11q 上的定位”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

Gomyo, H., Murakami, Y.et al.: "A 2MB sequencce-ready contig map a novel candidate tumor suppressor gene IGSF4 in the LOH region of chromosome11q23.2"Genomics. 62. 139-146 (1999)

Gomyo, H.、Murakami, Y.等人：“一个 2MB 序列就绪的重叠群在染色体 11q23.2 的 LOH 区域绘制了一个新的候选肿瘤抑制基因 IGSF4”基因组学。

Kuchiki, H, Murakami, Y.et al.: "Detection of DNA abnormalities by arbitrarily primed PCR fingerprinting : amplification of the MDM2 gene in a mediastinum fibrosarcoma"Biochem Biophys Res. Commun.. 258. 271-277 (1999)

Kuchiki, H, Murakami, Y.等人：“通过任意引发的 PCR 指纹检测 DNA 异常：纵隔纤维肉瘤中 MDM2 基因的扩增”Biochem Biophys Res。