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マウス胚性幹細胞における遺伝子ネットワーク解析

小鼠胚胎干细胞的基因网络分析

基本信息

批准号：
12206063
负责人：
山中伸弥
金额：
--
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

胚性幹(ES)細胞は動物の早期胚より分離された細胞で、体内のすべての細胞に分化する能力、すなわち分化全能性を維持している。ES細胞はノックアウトマウスによる遺伝子機能解析という革新的な技術をもたらし、最近では再生医学への応用も期待されている。しかしES細胞が分化全能性を維持するメカニズムについてはほとんどわかっていない。本研究の目的はES細胞の分化全能性維持に関与する遺伝子群の相互関係を解析し、遺伝子ネットワークを明らかにすることである。ES細胞の分化全能性維持に必須の遺伝子としてはまずNAT1を取り上げた。NAT1遺伝子を破壊したES細胞は未分化状態では正常に増殖するが、分化能が著しく抑制される。正常ES細胞とNAT1-/-ES細胞での遺伝子発現プロファイルをDNAマクロアレー、マイクロアレー、およびノーザンブロットにより解析した。未分化状態およびレチノイン酸により分化を誘導した状態について解析した。正常細胞ではレチノイン酸により多数の遺伝子発現が上昇または低下した。一方、NAT1-/-細胞においてはそれら遺伝子発現変化の大部分が抑制されていた。しかし、一部の遺伝子はNAT1-/-細胞においても正常細胞と同程度の反応を示した。これらの実験結果は、NAT1がES細胞分化にともなう遺伝子カスケードの上流に位置することを示す。しかし、NAT1非依存的なパスウェイも存在することがわかった。今後はNAT1-/-細胞における結果を他の分化全能性必須遺伝子群、例えばp300やGrb2などを破壊したES細胞の結果と比較し、相互関係を解析する予定である。

Embryonic stem (ES) cells are responsible for the isolation and differentiation of early embryonic cells in animals, their ability to differentiate and maintain their differentiation and totipotency in vivo. ES cell function analysis and innovationなTechnology をもたらし, ではRegenerative medicine への応用もLook forward to されている recently. The differentiation and totipotency of ES cells is maintained by maintaining the differentiation and totipotency of ES cells. The purpose of this study is to analyze the relationship between the differentiation and totipotency maintenance of ES cells and the relationship between the remaining subgroups and the remaining subgroups. It is necessary to maintain the differentiation and totipotency of ES cells. The NAT1 gene is used to destroy ES cells in an undifferentiated state, which means they can proliferate normally and their differentiation ability can be suppressed. Normal ES cells and NAT1-/-ES cells are the same as those of NAT1-/-ES cells. Aマクロアレー、マイクロアレー、およびノーザンブロットによりanalyticsした. Undifferentiated state およびレチノイン acid により differentiation を induced した state について analysis した. Normal cells have a lot of acid and a lot of them, and they appear to be rising and falling. On the one hand, most of the NAT1-/- cells have been suppressed since they were changed.しかし、One part of the remaining 伝子はNAT1-/- cells are normal cells and have the same degree of reaction. The result of the test and the differentiation of NAT1 ES cells are shown in the upper part of the test.しかし、NAT1 non-dependent なパスウェイもexistent することがわかった. In the future, the differentiation of NAT1-/- cells will be necessary for the differentiation of totipotent subgroups, example, p30 0やGrb2 has been broken down and the results of ES cells have been compared, and the correlation has been analyzed and determined.