权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

がん化に伴うDNA複製開始制御の変化

与癌变相关的 DNA 复制起始控制的变化

基本信息

批准号：
12215107
负责人：
水島徹
金额：
$ 15.36万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215107/
关键词：
DNA複製 ORC Cdc6p ATP がん ATPase 再構成

项目摘要

我々は真核生物の複製開始因子であるORCのATPase活性がORC'の不活性化(再複製開始抑制機構)に関与していると考え、この考え方が正しいことを示唆した(Mizushima, T. et al.Genes ＆ Dev. 2000)。さらに、これまでその機能が未知であったCdc6pのATPase活性の機能解析も行った。我々は、Cdc6pが自身のATPase活性を使って、ORCの高次構造を変化させ、ORCが複製origin特異的に結合することを助けることを示した(Mizushima, T. et al. Genes ＆ Dev.2000)。このORCの高次構造変化は、DNAヘリカーゼであるMCMを複製originに誘導することに関与していると考えている。以上の結果は、Cdc6PのATPase活性がORCとは逆に複製を正に制御していることを示唆している。これらの研究は真核生物の染色体DNA複製制御の生化学的解析におけるブレークスルーになるという点で、世界的に注目されている。細胞のがん化に伴い、DNA複製の開始制御機構も変化すると考えられているが、その実体は明らかではない。我々は上記の研究により、ORC、及びCdc6PのATPaseがDNA複製開始制御において重要な役割を果たしていることを示唆したので、これらの活性が細胞のがん化に伴い変化する可能性を考えた。そこで今年度我々は、ヒト正常細胞の核粗抽出液中にORC、及びCdc6PのATPase活性の促進因子が存在するか否かを調べた。粗抽出液をカラムにかけて調べたところ、ORC、及びCdc6pのATPaseに対する促進活性の複数のピークが観察された。がん細胞の核抽出液も同様に解析したとこと、正常細胞とは違うカラムパターンを示した。このことは、細胞のがん化に伴い、ORC、及びCdc6PのATPase活性が変化することが、がん細胞の異常な複製開始に関与している可能性を示している。この結果は、これまで研究が遅れてきた、がん化とDNA複製開始制御の関係に新しい観点を導入するものである。

ORC ATPase activity and ORC inactivation in eukaryotic replication initiation factors (Mizushima, T. et al.Genes & Dev. 2000)。The function of Cdc6p ATPase is unknown. Cdc6p and Cdc6p have their own ATPase activity, ORC higher-order structural changes, ORC replication origin-specific binding, and so on (Mizushima, T. et al. Genes & Dev.2000)。The high-order structural transformation of ORC, DNA, MCM, etc. The results showed that the ATPase activity of Cdc6P was controlled by ORC and reverse replication. This research focuses on the biochemical analysis of chromosome DNA replication control in eukaryotes and the attention of the world Cell DNA replication and DNA replication start to control the mechanism of change, and the real body changes. In our previous study, we examined the possibility of DNA replication initiation by ORC and Cdc6P ATPases, which are important for DNA replication initiation. This year, we found that ORC and Cdc6P in nuclear extracts of normal cells were regulated by the presence or absence of promoting factors. The crude extract was found to be able to modulate the activity of the enzymes, ORC, and Cdc6p. The nuclear extract of the cell was analyzed in the same way as the normal cell. This indicates the possibility that the cell's ATPase activity changes due to the presence of ORC and Cdc6P, and that abnormal replication of the cell begins. The results of this study are as follows: 1. The relationship between DNA replication initiation and control; 2.