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Whole-in-oneシステムによる生命の創成

Whole-in-oneシステムによる生命の創成
使用一体化系统创造生命
批准号：
12875152
负责人：
上田 卓也
金额：
$1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2000 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12875152/
关键词：
人工細胞バイオシステム蛋白質合成系

项目摘要

项目成果

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大腸菌の蛋白質合成系に関与する可溶性の蛋白性因子(開始因子、伸長因子、終結因子、アミノアシル合成酵素等)の31種類の因子をクローニング、大量発現、精製を行った。さらに、リボソームも極めて純度のものを単離し、また80種類のtRNAを含む画分を調整した。これらの170種類の分子種から再構築することにより、蛋白質合成活性をもった蛋白質合成系(PUREシステム)の作製に成功した。PUREシステムは、1mlあたり0.2mgの蛋白質の生産が可能であった。現在生体外蛋白質合成系または無細胞蛋白質合成系と称されているものは、すべて細胞を破砕した抽出液に過ぎず、真の意味での生体外蛋白質合成系は申請者の本システムがはじめてである。このシステムは、蛋白質分解酵素や核酸分解酵素を含まず、また実験者がその反応を自由に制御できる点で、大変優れた遺伝子発現システムの構築に成功したといえる。このシステムにより、MS2やQβなどのファージを創製することを試みたが、感染能を有するファージを造り出すことはできなかった。同時の並行して、大腸菌の抽出液を用いたシステムでは、感染能を有するファージが生産された。このことから、こうしたファージのアセンブリーには大腸菌由来の蛋白質が関与していることが、示唆された。
期刊论文(5)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Yasukawa, T: "Defect in modification at the anticodon wobble nucleotide of mitochondrial tRNA^<Lys> with the MERRF encephalomyopathy pathogenic mutation"FEBS Letters. 467. 175-178 (2000)
Yasukawa, T：“线粒体 tRNA^<Lys> 的反密码子摆动核苷酸修饰缺陷与 MERRF 脑肌病致病性突变”FEBS Letters。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yasukawa, T: "A pathogenic point mutation reduces stability of mitochondrial mutant tRNA^<lle>"Nucleic Acids Research. 28. 3779-3784 (2000)
Yasukawa, T：“致病性点突变降低了线粒体突变 tRNA^<lle> 的稳定性”核酸研究。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tomari, Y: "The role of tightly bound ATP In Escherichia coli tRNA nucleotidyltransferase"Genes to Cells. 5. 689-698 (2000)
Tomari, Y：“紧密结合的 ATP 在大肠杆菌 tRNA 核苷酸转移酶中的作用”基因到细胞。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yasukawa, T: "Modification Defect at Anticodon Wobble Nucleotide of Mitochondrial tRNAs^<Leu>(UUR) with Pathogenic Mutations of Mitochondrial Myopathy, Encephalopahty, Lactic Acidosis, and Stroke-like Episodes"J. Biol. Chem.. 275. 4251-4257 (2000)
Yasukawa, T：“线粒体 tRNAs^<Leu>(UUR) 反密码子摆动核苷酸的修饰缺陷与线粒体肌病、脑病、乳酸性酸中毒和中风样发作的致病性突变”J。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
セルフリーイムノロジーによる人工抗体作製法の開発
  • 批准号：
    18038006
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.09万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    上田 卓也
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
翻訳における終結と開始の連携機構の解明
  • 批准号：
    17026008
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.58万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    上田 卓也
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
試験管内遺伝子発現系を用いたタンパク質の機能発現プロセスの研究
  • 批准号：
    17028010
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.12万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    上田 卓也
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
疾患関連蛋白質の生産技術の開発
  • 批准号：
    16012210
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.52万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    上田 卓也
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
海外基金