Untersuchungen zur Funktion von streßaktivierten Proteinkinasen bei der Interleukin 1 induzierten Genexpression

白细胞介素-1是一种抗肿瘤的促炎因子。细胞内激素的激活主要是酶MAP激酶激酶7（MKK 7），以及磷酸化和激活的蛋白激酶（SAPK/JNK）。我们首先证明了SAPK/JNK在稳定转染Zellinien中的选择性作用，揭示了IL-1对IL-8和IL-6内源性基因调控的信号通路。在本研究中，我们发现SAPK/JNK对转基因和转基因后的韦尔登的调控分子机制。在建立人类Zellkulturmodellen基因组的基础上，研究了MKK 7/SAPK/ JNK信号通路的蛋白质表达和修饰，从而发现了韦尔登。通过对多个MKK 7蛋白的选择性或激活性韦尔登进行调节性表达，可以将这些激酶途径整合到Zellen体内。通过二维（2D）凝胶电泳获得从Zellen溶液中提取的蛋白质，并通过韦尔登进行蛋白质分析。

Interleukin-1 ist eines der wirkungsvollsten pro-inflammatorischen Zytokine. Intrazellulär aktiviert das Hormon sehr stark das Enzym MAP Kinase Kinase 7 (MKK7), welches streßaktivierte/ Jun-N-terminale Proteinkinasen (SAPK/JNK) phosphoryliert und aktiviert. Mittels selektiver Hemmung von SAPK/JNK in stabil transfizierten Zellinien haben wir als erste demonstriert, daß dieser Signalweg bei der IL-1 abhängigen Regulation der endogenen Gene für IL-8 und IL-6 eine entscheidende Rolle spielt. In dem beantragten Projekt soll daher zum einen als Folgeantrag dieser Arbeiten der molekulare Mechanismus der Regulation dieser Gene durch SAPK/JNK auf transkriptioneller und posttranskriptioneller Ebene aufgeklärt werden. Zum anderen soll in den etablierten humanen Zellkulturmodellen die Gesamtheit aller Proteine, deren Expression und Modifikation von dem MKK7/SAPK/ JNK Signalweg abhängt, untersucht werden. Dazu soll dieser Kinaseweg in intakten Zellen durch regulierbare Überexpression von mutierten MKK7 Proteinen selektiv gehemmt oder aktiviert werden. Die Proteine aus Extraktion dieser Zellen sollen durch zwei-dimensionale (2D) Gelelektrophorese getrennt und eine proteomanalytische Untersuchung durchgeführt werden.