シア・ストレス応答性cDNAの包括的単離と動脈硬化における役割の解明

全面分离乳木果应激反应 cDNA 并阐明其在动脉硬化中的作用

• 批准号: 13204056
• 负责人: 山下 静也
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13204056/
• 关键词: 血管内皮; shear stress; Rho small GTPase

ヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)をマイクロビーズ上に培養し、培養液を撹拌し、多方向からshear stressを負荷した。これらの細胞より作成した差分化cDNAライブラリー中、0.4kb以上のインサートが挿入されているクローンを560個選んでノーザン解析を行ったところ63個の遺伝子でshear stress依存性のRNA転写増加を確認した。このうち既知の遺伝子は50種あり、endothelin-1、MCP-1、thrombomodulin、TGF-β、HB-EGFなどshear stress依存性発現誘導の報告があるものが7種、動脈硬化と関連があるものが9種含まれていた。新規遺伝子は13種単離され、その中に低分子量G蛋白質コンセンサス配列を持つクローンが2個存在し、このうち1つはRho familyのRhoAと61%、Rac1と62%、Cdc42と63%のホモロジーを持つものであった。この2つの分子について、多方向性shear stressと平行平板培養系で一方向性層流shear stressの影響との比較検討を行ったところ、Rho familyとホモロジーを有する分子はどちらのstressでも発現上昇が見られたが、一方向性層流shear stressでの発現上昇の方がより顕著であった。一方、もう一つの分子は多方向性shear stressで著しい発現上昇が見られたが、一方向性層流shear stressでは全く反応を示さなかった。また、shear stress作動性の報告のある既知の遺伝子群の中で、MCP-1、HB-EGF、TGF-βなどは両方のstressで発現上昇が見られ、endothelin-1、PAI-1などは多方向性shear stressでのみ強い発現上昇が認められた。異なるshear stressに対する反応性の差異で2群に分類することができた。

The vascular endothelial cells (HUVEC) were incubated, the culture solution was mixed, and the shear stress cells were loaded in many directions. In the middle of the cDNA database, the number of customers above 0.4kb was analyzed. The number of customers in the database was 560. There were 63 bank accounts in which the shear stress dependent RNA was written and confirmed. It is known that there are 50 kinds of drugs, endothelin-1, MCP-1, thrombomodulin, TGF- β, and HB-EGF. There are 7 kinds of lead reports, 7 kinds of drugs, and 9 kinds of drugs that contain anti-cancer drugs. In the new specification, 13 kinds of isolates, medium-low molecular weight G protein and low molecular weight G protein antigens were assigned to 2 existing strains, 1-year Rho familyRhoA 61%, Rac1-62%, Cdc42-63% antigens. Two-dimensional molecular parallel plate culture, multi-directional shear stress parallel plate culture, one directional flow shear stress, one direction, one direction, one One party, one molecule, one molecule, one direction, one side, one side, one side It is known that the subgroups of stress, MCP-1, HB-EGF, TGF- β, stress, endothelin-1, PAI-1, multi-directional shear stress, and so on, are known to be in the subgroup of human beings. Please shear stress the difference in sex. 2 groups are classified into categories.

项目成果

Yoshisue Hajime, et al.: "A large scale isolation of shear stress-responsive genes from cultured human endothelial cells by preparation of a subtracted cDNA library"Atherosclerosis. (in press).

Yoshisue Hajime 等人：“通过制备消减 cDNA 文库，从培养的人内皮细胞中大规模分离剪切应力响应基因”动脉粥样硬化。