真核細胞RecQ関連遺伝子群によるゲノム構造の維持機構

真核RecQ相关基因的基因组结构维持机制

• 批准号: 13206003
• 负责人: 関 政幸
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206003/
• 关键词: RecQ; Mms4; 組換え; 合成致死; Sgs1

出芽酵母SGS1は、3つのヒトRECQ遺伝病原因遺伝子の相同遺伝子であり、ヒトと酵母で"ゲノム不安定化"という共通の表現型が観察される。本研究では、SGS1とその周辺で働く遺伝子群を同定し、解析する。当初計画としては、1)既に複数単離した"sgs1破壊株と合成致死となる変異株"の全ての原因遺伝子をクローニングする。2)合成致死株の致死性を多コピーで抑制する酵母ゲノム遺伝子を同定する。3)1,2)で得られた情報から遺伝子破壊株を作製し、sgs1変異との関係を決定する計画だった。【13年度の成果】1)についてはMMS4,SRS2遺伝子のクローニングに成功した。しかし、1)の一部の計画は中止した。2)についてはsgs1-srs2株の合成致死性を抑制できる多コピー抑制遺伝子のスクリーニングを行い、少なくとも現在までに"致死性を抑制する2つのゲノム断片(ZAP1〜TDH1,YDL381C-A〜EFT2)"を得ており、この中に複数含まれるどのORFが抑制活性を有するか同定中である。3)についてはmms4株の解析より、「MMS4はSGS1と同様にDNA組換え修復経路で働くこと」、「大腸菌のHolliday junctionを切断するRusAタンパク質をmms4株に発現させるとmms4株における修復欠損が回復すること」、「相同染色体間の組換えは、DNA傷害剤の存在下に、mms4株では野生型の5倍亢進されること」を明らかにした。つまり、Mms4は全ての組換えに機能を果たすのではなく、ある特定の基質中のHolliday junctionを切断することが重要であることを本研究で初めて示唆できた。

Budding yeast SGS1 は, 3 つ の ヒ ト RECQ heritage 伝 cause of disease but 伝 の same heritage 伝 son で あ り, ヒ ト と yeast で "ゲ ノ ム stabilization" と い う の common phenotype が 観 examine さ れ る. In this study, で とそ, SGS1とそ とそ, 辺で zhou 辺で, く subgroup を are determined to を and analyzed to する. Original plan と し て は, 1) both に plural 単 し た "sgs1 broken 壊 strains と synthetic lethal と な る - different strains" の full て の reason but 伝 child を ク ロ ー ニ ン グ す る. 2) The synthetic lethal strain has a large number of コピ で で で inhibitory effects on する yeast ゲノム progeny 伝 を and する. 3) 1, 2) で ら れ た intelligence か ら heritage 伝 し, broken 壊 strains を son sgs1 - different と の masato is determined を す る project だ っ た. 【13 Annual <s:1> Achievements 】1)に に て て MMS4,SRS2 left 伝 child <s:1> ロ ニ ニ グに グに successful た た. <s:1> た た, 1) <s:1> a project た is suspended た. 2) に つ い て は sgs1 - srs2 strains の synthetic lethal を inhibit で き る more コ ピ ー inhibit heritage 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ を い, less な く と も now ま で に を "deadly suppression す る 2 つ の ゲ ノ ム fragment (ZAP1 ~ TDH1 YDL381C - A ~ EFT2)" を have て お り, こ の に in complex containing ま れ る The inhibitory activity of <s:1> <s:1> ORFが を is co-determined by する である. 3) に つ い て は mms4 strains の parsing よ り, "mms4 は SGS1 と with others in groups in え に DNA repair 経 road で 働 く こ と", "coliform の Holliday Junction を cut す る RusA タ ン パ ク qualitative を mms4 strains に 発 now さ せ る と mms4 strains に お け る repair owe loss が reply す る こ と ", "the same chromosome の between groups in え は, the presence of DNA damage tonic の に, mms4 strains で は wild type 5 times の hyperthyroidism さ れ る こ と" を Ming ら か に し た. つ ま り, Mms4 は full て の group in え に function を fruit た す の で は な く, あ る specific の matrix の Holliday junction を cut す る こ と が important で あ る こ と を at the beginning of this study で め て in stopping で き た.

项目成果

Onodera, R., et al.: "Functional and physical interaction between sgs1 and Top3 and sgs1-independent function of top3 in DNA recombination repair"Gen.Genet.Syst.. (in press). (2002)

Onodera, R., et al.：“sgs1 和 Top3 之间的功能和物理相互作用以及 top3 在 DNA 重组修复中的 sgs1 独立功能”Gen.Genet.Syst..（出版中）。

Kawabe, Y., et al.: "A novel protein interacts with the Werner's syndrome gene product physically and functionally"J. Biol. Chem.. 276. 20364-20369 (2001)

Kawabe, Y. 等人：“一种新型蛋白质在物理和功能上与维尔纳综合征基因产物相互作用”J.

Suzuki, H. et al.: "The N-terminal internal region of BLM is required for the formation of dots/rod-like structures which are associated with SUMO-1"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 286. 322-327 (2001)

Suzuki, H. 等人：“BLM 的 N 端内部区域是形成与 SUMO-1 相关的点/棒状结构所必需的”Biochem。

Ui, A., et al.: "The N-terminal region of Sgs1,which interacts with top3,is required for complementation of MMS sensitivity and suppression of hyper-recombination in sgs1 disruptants"Mol.Gen.Genet.. 265. 837-850 (2001)

Ui, A. 等人：“Sgs1 的 N 末端区域与 top3 相互作用，是补充 MMS 敏感性和抑制 sgs1 破坏子中超重组所必需的”Mol.Gen.Genet.. 265. 837

Onoda, F., et al.: "Involvement of SGS1 in DNA damage induced heteroallelic recombination that require RAD52"Mol.Gen.Genet.. 264. 702-708 (2001)

Onoda, F., et al.：“SGS1 参与需要 RAD52 的 DNA 损伤诱导的异等位基因重组”Mol.Gen.Genet.. 264. 702-708 (2001)