DNA複製時におけるゲノム不安定化の防御システムの解明

阐明 DNA 复制过程中针对基因组不稳定性的防御系统

• 批准号: 13214063
• 负责人: 中川 拓郎
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214063/
• 关键词: DNA複製; DNA組換え; DNA修復; MCM; Cdc45; アフリカツメガエル; 酵母; 染色体

DNA複製に伴うゲノム不安定化の防御機構に重要な役割を果たす因子を明らかにし、その働きを知る事を目的とする。1.DNA複製中間体に結合する因子の検出DNA複製中間体(複製フォーク)と同様の構造を持つモデル分子(Dループ)を作成した。このDNA分子と特異的に相互作用する因子を検出する系をDNA複製に関わる蛋白を多く含むアフリカツメガエル卵抽出液を用いて確立した。この系を利用して、染色体異常を引き起こす可能性がある停止、あるいは、衝突した複製フォークのプロセッシングに関わる因子のアフリカツメガエル卵抽出液からの単離・精製を目指している。2.DNA複製フォーク構成因子とゲノム不安定化の防御機構に於ける役割DNA複製に必須、且つ、複製フォークの構成因子であるMCMヘリケースやこのMCMやDNAポリメラーゼと相互作用するCdc45蛋白の温度感受性分裂酵母を利用した実験結果から、MCMヘリケースとCdc45蛋白が停止した複製フォークのプロセッシングに重要な役割を果たすことを明らかにした。MCM、Cdc45の変異が紫外線やヒドロキシウレア(DNA合成阻害剤)に感受性をもたらし、同一染色体間や異染色体間でのDNA組換えを減少させる事を明らかにした。更に、MCM、Cdc45がDNA修復に働くRqh1(ヒトBLM/WRN相同遺伝子)と協調的に紫外線照射によるDNAダメージを乗り越える事や、MCM、Cdc45の変異が細胞周期チェツクポイント因子であるCds1(ヒトChk1相同遺伝子)やMrc1(Cds1と相互作用する)の変異株のヒドロキシウレア感受性を抑制する事が分かった。

DNA replication に with う ゲ ノ ム not stabilization の defense agency に important な "を cut fruit た す factor を Ming ら か に し, そ の 働 き を know what る を purpose と す る. 1. DNA replication intermediates に combining す る factor の 検 DNA replication intermediates (copy フ ォ ー ク) with others と の tectonic を hold つ モ デ ル molecules (D ル ー プ) を made し た. こ の DNA molecular interaction と specific に す る factor を 検 out す る department を DNA replication に masato わ る を く contain more protein む ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル eggs extract を with い て establish し た. こ の is を using し て, chromosome abnormality を lead き こ す possibility が あ る stop, あ る い は, conflict し た copy フ ォ ー ク の プ ロ セ ッ シ ン グ に masato わ る factor の ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル eggs extract か ら の 単 from, refined を refers し て い る. 2. DNA replication フ ォ ー ク constitute factor と ゲ ノ ム not stabilization の defense agency に in け る servants must cut DNA replication に, and つ, copied フ ォ ー ク の constitute factor で あ る MCM ヘ リ ケ ー ス や こ の MCM や DNA ポ リ メ ラ ー ゼ と interaction す る Cdc45 protein の temperature sensitivity division を using yeast し た be 験 results か ら, MCM ヘ リ ケ ー ス と Cdc45 protein が stop し た copy フ ォ ー ク の プ ロ セ ッ シ ン グ に important な "を cut fruit た す こ と を Ming ら か に し た. MCM, Cdc45 の - different が ultraviolet や ヒ ド ロ キ シ ウ レ ア (DNA synthesis resistance against tonic) に susceptibility を も た ら し, the same chromosome や different chromosomes で の DNA group in え を reduce さ せ る matter を Ming ら か に し た. More に, MCM, Cdc45 が DNA repair に 働 く Rqh1 (ヒ ト BLM/WRN same heritage 伝) と coordinated に ultraviolet irradiation に よ る DNA ダ メ ー ジ を 乗 り more え る や, MCM, Cdc45 の - different が cell cycle チ ェ ツ ク ポ イ ン ト factor で あ る Cds1 (ヒ ト Chk1 same heritage 伝) や Mr c1(Cds1と interaction する) <s:1> variant <s:1> ヒドロキシウレア sensitively を inhibits する events が った った.

项目成果

Takuro Nakagawa: "The MER3 helicase involved in meiotic crossing over is stimulated by singlestranded DNA-binding proteins and unwinds DNA in the 3'to5' direction."Journal of Biological Chemistry. 276. 31487-31493 (2001)

Takuro Nakakawa：“参与减数分裂交换的 MER3 解旋酶受到单链 DNA 结合蛋白的刺激，并以 3 至 5 方向解旋 DNA。”《生物化学杂志》。

Takuro Nakagawa: "Saccharomyces cerevisiae Mer3 is a DNA helicase involved in meiotic crossing over."Molecular and Cellular Biology. (in press).

Takuro Nakakawa：“酿酒酵母 Mer3 是一种参与减数分裂交叉的 DNA 解旋酶。”分子和细胞生物学。