肝炎ウイルスの持続感染制御因子および肝炎肝がん発症機序の解析とその制御

肝炎病毒持续感染控制因素分析及肝炎肝癌发病机制及防治

• 批准号: 13214120
• 负责人: 小原 道法
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214120/
• 关键词: C型肝炎; 発癌; 感染性cDNAクローン; トランスジェニックマウス

「目的と意義」C型肝炎ウイルス(HCV)は高率に肝癌を引き起こすがその発癌機構には不明な点が依然として多く、その発癌機構の解明を目的とした。「材料と方法」Cre・loxPシステムによりスイッチング発現するヒト由来肝細胞株を樹立し解析を行った。HCVが慢性感染した肝臓は、炎症と再生を繰り返し、これに伴って細胞の増殖形質に変化が引き起こされる可能性がある。これを検討するため、スイッチング発現した全長HCV発現細胞を44日間継代し細胞の増殖変化を追跡した。「結果」HCV発現細胞の腫瘍原性変化を解析するため、コロニー形成能とヌードマウス腫瘍形成能を解析した。全ゲノムを発現した場合にのみコロニー形成能、腫瘍形成能の上昇が認められた。HCV全ゲノム発現細胞ではIFNが誘導され、NF-kB、cdk2、Rbのリン酸化、E2F活性が亢進していた。構造蛋白質および非構造蛋白質発現細胞ではこうした変化は認められなかった。そこで、Rbを段階的にリン酸化するcdkの活性について解析した。Rbのリン酸化はcdk4/6が、高リン酸化はcdk2が担うという報告があるため、全長HCV継代細胞でこれらの経路が変化しているかを解析した。その結果、44日間継代した細胞では特にcdk2活性が上昇していた。以上の様に、HCV全長を発現継代した細胞ではcdk2が主に活性化する事によりRbが高リン酸化されE2Fが活性化する事が明らかとなった。「考察」HCV全ゲノム発現による腫瘍原性亢進はHCV遺伝子複製によるNF-kB、Rbのリン酸化、E2F経路の活性化が重要であると考えられ、さらに解析を進めている。

"Purpose and significance" Hepatitis C virus (HCV) high rate of liver cancer, the cause of cancer, the mechanism of cancer, the point of still more, the mechanism of cancer, the purpose of understanding. "Materials and Methods" Cre. loxP System Development and Analysis of Liver Cell Lines HCV chronic infection, liver inflammation, regeneration, and the possibility of cell proliferation. The development of full-length HCV developing cells was traced back to 44 days ago. The results showed that HCV gene expression in cells was characterized by the ability of tumor formation and tumor differentiation. All the time, the formation energy and the formation energy of the tumor were increased. HCV gene expression cells were induced by IFN, NF-kB, cdk2, Rb and E2F. Structural protein and non-structural protein are found in cells. The activity of cdk is analyzed in the following ways: Rb and cdk4/6, cdk2 and cdk 4/6 were analyzed. As a result, the activity of cdk2 increased in 44 days. The above results indicate that HCV full-length development in cells with CDK2 activity and Rb hyperactivity and E2F activity is a major cause of HCV infection. "Investigation" HCV complete gene development, tumorigenic hyperactivity, HCV gene replication, NF-kB, Rb protein acidification, E2F pathway activation are important.

项目成果

K. Tsukiyama-Kohara: "Adipose tissue reduction in mice lacking the translational inhibitor 4E-BP1"Nature Med.. 7. 1128-1132 (2001)

K. Tsukiyama-Kohara：“缺乏翻译抑制剂 4E-BP1 的小鼠脂肪组织减少”Nature Med.. 7. 1128-1132 (2001)

Y. Shimoda: "Pax-6 controls the expression of Lewis x epitope in the embryonic forebrain by regulating 1, 3-fucosyltransferase IX expression"J. Biol. Chem.. (in press). (2002)

Y. Shimoda：“Pax-6 通过调节 1, 3-岩藻糖基转移酶 IX 的表达来控制胚胎前脑中 Lewis x 表位的表达”J.

T. Ito: "Establishment of a Quantitative Assay for HCV Infectivity in a Cell Culture System"Hepatology. 34. 566-572 (2001)

T. Ito：“细胞培养系统中 HCV 感染性定量测定的建立”肝病学。

K. Machida: "Inhibition of cytochrome C release in Fas-mediated signaling pathway in transgenic mice induced to express hepatitis C viral proteins"J. Biol. Chem.. 276(15). 12140-12146 (2001)

K. Machida：“在诱导表达丙型肝炎病毒蛋白的转基因小鼠中，抑制 Fas 介导的信号通路中细胞色素 C 的释放”J.

T. Hiigle: "The hepatitis C virus nonstructural protein 4B is an integral endoplasmic reticulim membrane protein"Virology. 284. 70-81 (2001)

T. Hiigle：“丙型肝炎病毒非结构蛋白 4B 是一种完整的内质网膜蛋白”病毒学。