ガレクチンファミリーを介した自然免疫系の活性化と感染応答の分子基盤

半乳糖凝集素家族介导的先天免疫系统激活和感染反应的分子基础

• 批准号: 13226084
• 负责人: 中村 隆範
• 金额: --
• 依托单位: Kagawa Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226084/
• 关键词: 自然免疫; 動物レクチン; ガレクチン; アフリカツメガエル; 好中球

ガレクチンはβ-ガラクトシド構造を持った糖鎖を特異的に認識する動物レクチンで、哺乳動物で12種類の遺伝子(galectin-1〜12)が同定されている。我々は、ガレクチンファミリーの自然免疫系における機能を知る目的で、ヒトガレクチン分子種のすべての遺伝子を取得し、それぞれのリコンビナントタンパクを調製した。さらに、galectin-12以外のすべてのガレクチンを特異的に認識するポリクローナル抗体も調製した。また、ガレクチンの生物種を越えた機能解析のため、アフリカツメガエルよりガレクチンタンパク質を精製し、12種類の新規ツメガエルガレクチン遺伝子のcDNAクローニングにも成功した(Glycobiology、H.Shoji et al.印刷中及び投稿準備中)。その結果、ヒトとカエル間の構造、組織分布、遺伝子発現の比較などからガレクチンファミリーが皮膚、消化管、肺など、特に生体防御の最前線で特徴的な発現をしていることを見い出した。中でもgalectin-4と-8は、カエルと哺乳動物でその組織分布もよく相関している。また、ヒトgalectin-9による顆粒球の活性化を解析する中、galectin-8が特異的に好中球の活性化(接着性の亢進、スーパーオキサイド産生)を誘導することを見い出し、さらに好中球上のgalectin-8受容体候補分子を精製した。そしてgalectin-8の二つの糖認識ドメイン(CRD)のうち、N-末端側CRDは好中球のproMMP-9と、C-末端側はproMMP-9とintegrinαMと結合することが分った。また、galectin-8の変異体を作成して機能解析したところ、細胞接着とスーパーオキサイド産生にはgalectin-8のC末端CRDと好中球のintegrinαMの結合が重要であることが分った(投稿中)。

半乳糖素是动物凝集素，在哺乳动物中已经鉴定出具有β-半乳糖苷结构的聚糖，并且已经鉴定出了12种类型的基因（Galectin-1至12）。我们获得了人乳糖素分子物种的所有基因，并制备了每种重组蛋白，以理解甘肠蛋白家族在先天免疫系统中的功能。另外，还制备了多克隆抗体特异性识别除lectectin-12以外的所有甲状腺素。此外，为了对跨物种的甘肠蛋白进行功能分析，从爪蟾中纯化了半凝集素蛋白，并成功克隆了12种新型Xenopus lectectin基因的cDNA（Glycobiology，H。Shoji等人在印刷和制备中以提交）。结果，我们发现，通过比较人类和青蛙之间的结构，组织分布和基因表达，甲状腺素家族具有独特的表达，尤其是在生物防御的最前沿，例如皮肤，胃肠道和肺部。其中，半乳糖素4和-8也与青蛙和哺乳动物的组织分布高度相关。此外，在分析人乳糖素9的粒细胞激活的同时，我们发现lectectin-8特异性诱导中性粒细胞活化（增强的粘附，超氧化物的产生）和进一步纯化的候选候选候选Galectin-8受体分子。然后发现半末端CRD的两个糖识别结构域（CRD）与中性粒细胞Prommp-9结合，并且C-末端的C末端侧与Prommp-9和整合性αM结合。此外，当我们创建了lectectin-8突变体并分析了功能分析时，我们发现半乳糖素-8 c末端CRD的结合和中性粒细胞整联蛋白αM对细胞粘附和超氧化物的产生至关重要（在Posting中）。

项目成果

Chabot, S. et al.: "Regulation of galectin-9 expression and release in Jurkat T cell line cells"Glycobiology. 12(in press). (2002)

Chabot, S. 等人：“Jurkat T 细胞系细胞中半乳糖凝集素 9 表达和释放的调节”糖生物学。

Sato, M. et al.: "Quantification of galectin-7 and its localization in adult mouse tissues"J. Biochem.. 131・2. 255-260 (2002)

Sato, M.等：“半乳糖凝集素7的定量及其在成年小鼠组织中的定位”J. Biochem.. 131・2 (2002)。

Shoji, H et al.: "Purification and cDNA cloning of Xenopus liver galectins, and their expression"Glycobiology. 12(in press). (2002)

Shoji, H 等人：“非洲爪蟾肝半乳糖凝集素的纯化和 cDNA 克隆及其表达”糖生物学。

Sato, M. et al.: "Functional analysis of the carbohydrate recognition domains and linker peptide of galectin-9 as to eosinophil chemoattractant activity"Glycobiology. 12(in press). (2002)

Sato, M. 等人：“半乳糖凝集素 9 的碳水化合物识别域和连接肽对嗜酸性粒细胞趋化活性的功能分析”糖生物学。

Yoshida, H. et al.: "Interleukin-1b stimulates galectin-9 expression in human astrocytes"Neuroreport. 12・17. 3755-3758 (2001)

Yoshida, H. 等：“Interleukin-1b 刺激人星形胶质细胞中的半乳糖凝集素 9 表达”Neuroreport 12・17 3755-3758 (2001)。