根性坐骨神経痛モデルにおける炎症反応と一次知覚ニューロンでの遺伝子発現

根性坐骨神经痛模型中初级感觉神经元的炎症反应和基因表达

• 批准号: 13877249
• 负责人: 野口 光一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877249/
• 关键词: 坐骨神経痛; ラット; 髄核; 神経炎; BDNF; NGF

根性坐骨神経痛において神経根に対する圧迫による機械的障害に加えて、髄核組織等への免疫反応が、坐骨神経痛などの臨床症状の原因であると云われて久しい。しかしながら、炎症反応のどのような因子が神経系の興奮性に影響を与えているのか、どのようなメカニズムで神経系の興奮性に影響を与えるか、という基本的な問題が解決されていない。本研究は、腰部脊髄神経根及び後根神経節周囲に浸潤している免疫系細胞からのNGFが、そのNGF受容体(TrkA)を持つ神経細胞において、BDNFmRNA発現を増加させる、という仮説を検証するのが、本申請の目的であった。1年間の研究の結果、次のような結果が得られた。1)根性坐骨神経痛モデルの作成川上らの方法により、ラット尾部の髄核・線維輪を採取し、腰髄一側(L4,5)レベルの神経根上に留置し、根性坐骨神経根モデルを作成した。その結果、短時間ではあるが、疼痛関連行動が有意に発症することが明らかとなった。2)同モデルにおける後根神経節におけるBDNFmRNA発現の検索当教室のサブクローニングしたBDNFcDNAから作成したcRNAプローブを用いて、in situハイブリダイゼーション法をモデル群とshamOP群の後根神経節に対して施行した結果、明らかにモデル群の術後3日目で、BDNFmRNAの増加が確認された。また、RT-PCRにおいても、この増加が確認された。3)同モデルにおけるNGF産生細胞の組織学的解析モデル動物の後根神経節及び後根に対して、NGF抗体を用いた免疫組織化学法を施行すると、NGF陽性の多数の細胞が確認された。二重染色法で検索すると、このNGF産生細胞の一部は、Schawann細胞や、macrophageであった。また、NGFを直接、後根神経節に投与すると、BDMFmRNAの増加が確認された。これらの結果は、雑誌Painに投稿され、良好の反応を得ている段階である。

Root sciatica is caused by stress, mechanical impairment, immune response, and the clinical symptoms of sciatica. The basic problem of the influence of inflammatory reaction factors on the excitability of the nervous system is solved. This study aims to demonstrate that NGF expression and NGF receptor (TrkA) in immune system cells and BDNF mRNA expression increase during peripheral nerve infiltration in lumbar spinal cord and dorsal nerve segments, thus achieving the objectives of this application. The results of this study during the past 1 year have been obtained. 1) Root sciatic nerve root preparation method: Take the nucleus of the tail and the linear wheel of the waist side (L4,5) and leave it on the root of the sciatic nerve root preparation. Results, short time, pain-related actions, intentional symptoms 2)BDNF mRNA expression was detected in the post-operative nerve segment of the same group. The expression of BDNF mRNA was confirmed by the results of the post-operative nerve segment of the same group on the 3rd day after operation. RT-PCR is the most effective method to detect the presence of DNA in human cells. 3)Histological analysis of NGF-producing cells was performed on the dorsal root ganglion and dorsal root of the animals. NGF-positive cells were identified by immunohistochemistry. The double staining method was used to detect NGF-producing cells, Schawann cells and macrophage. The expression of NGF mRNA was confirmed by direct and post-natal nerve cell transfer. The results of this review are as follows:

项目成果

Hashimoto N, Yamanaka H, Fukuoka T, Obata K, Mashimo T, Noguchi K.: "Expression of hepatocyte growth factor in primary sensory neurons of adult rats"Brain Res Mol Brain Res. 97(1). 83-88 (2001)

Hashimoto N、Yamanaka H、Fukuoka T、Obata K、Mashimo T、Noguchi K.：“成年大鼠初级感觉神经元中肝细胞生长因子的表达”Brain Res Mol Brain Res。

Fukuoka T, Kondo E, Dai Y, Hashimoto N, Noguchi K.: "Brain-derived neurotrophic factor increases in the uninjured dorsal root ganglion neurons in selective spinal nerve ligation model"J Neurosci. 21(13). 4891-4900 (2001)

Fukuoka T、Kondo E、Dai Y、Hashimoto N、Noguchi K.：“选择性脊神经结扎模型中未受伤的背根神经节神经元中脑源性神经营养因子增加”J Neurosci。

Kondo, E., Iwata, K., Ogawa, A., Tashiro, A., Tsuboi, Y., Fukuoka, T., Yamanaka, H., Dai, Y., Morimoto, T., Noguchi, K.: "Involvement of glutamate receptors on hyperexcitability of wide dynamic range neurons in the gracile nucleus of the rats with experim

近藤，E.，岩田，K.，小川，A.，田代，A.，坪井，Y.，福冈，T.，山中，H.，戴，Y.，森本，T.，野口，K.：

Hashirnoto N, Yamanaka H, Fukuoka T, Dai Y, Obata K, Mashimo T, Noguchi K.: "Expression of HGF and cMet in the peripheral nervous system of adult rats following sciatic nerve injury"Neuroreport. 12(7). 1403-1407 (2001)

Hashirnoto N、Yamanaka H、Fukuoka T、Dai Y、Obata K、Mashimo T、Noguchi K.：“坐骨神经损伤后成年大鼠周围神经系统中 HGF 和 cMet 的表达”Neuroreport。

Tsuzuki K, Kondo E, Fukuoka T, Dai.Y, Tsujino H, Sakagami M, Noguchi K.: "Differential regulation of P2X(3) mRNA expression by peripheral nerve injury in intact and injured neurons in the rat sensory ganglia"Pain. 91. 351-360 (2001)

Tsuzuki K、Kondo E、Fukuoka T、Dai.Y、Tsujino H、Sakagami M、Noguchi K.：“大鼠感觉神经节完整和受损神经元周围神经损伤对 P2X(3) mRNA 表达的差异调节”疼痛。