脊髄損傷にによる神経ペプチド発現誘導と神経栄養因子による制御機構

脊髓损伤诱导神经肽表达及神经营养因子的控制机制

• 批准号: 08878143
• 负责人: 野口 光一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878143/
• 关键词: 脊髄損傷; ダイノルフィン; in situハイブリダイゼーション法; 神経栄養因子; in situ ハイブリダイゼーション法

内因性オピオイドペプチドであるダイノルフィンは脊髄損傷後、脊髄で増加し二次的な神経傷害の病因になっていると考えられている。しかし、ダイノルフィンが脊髄のどの細胞に発現しているかはまだ確認されていない。そこで、脊髄損傷後のダイノルフィンの発現をラジオアイソトープ標識合成オリゴヌクレオチドプローブを用いたin situハイブリダイゼーション法により検討した。SDラットの下部胸椎を椎弓切除して脊髄に重錘を落とし、脊髄損傷モデルを作成した。ラットを損傷後4時間から1週間で潅流固定後、脊髄を取り出して組織切片を作成し、in situハイブリダイゼーション法を行った。ダイノルフィンmRNAの発現は損傷後4hより増加し始め、24h-48hでは損傷部位周辺の頭側及び尾側で著しく増加し、損傷部位頭側でのPPD mRNAの増加後の減少は麻痺の回復のみられる損傷後1wに一致していた。一方、損傷尾側でのPPD mRNAの増加の遷延はPPD mRNA発現ニューロンが、遠心性線維により影響をうけており、脊髄損傷によって脱抑制が起こり、activationされた可能性が考えらる。各個体の傾斜台角度とPPDmRNA陽性細胞数との相関関係をみると、両者は相関係数-0.848の負の相関を示し、脊髄損傷24h後の運動機能障害とPPDmRNAの発現量はよく相関していた。脊髄で増加したダイノルフィンは過去に報告された血流の減少や興奮性アミノ酸の増加や、リン脂質の加水分解、などのメカニズムを介して、脊髄に障害を与えていると考えられる。trkBmRNAの発現を同様の手法で検討した。trkBmRNAは損傷部位に限局して発現していた。BDNF (Brain derived neurotropic factor)を脊髄損傷前よりくも膜下に投与し、ダイノルフィンmRNA発現の変化を検索したが、特に発現の変化を観察されなかった。

Endogenous オ ピ オ イ ド ペ プ チ ド で あ る ダ イ ノ ル フ ィ ン は spinal marrow after injury, spinal marrow で raised plus し な 経 damage の god causes of secondary に な っ て い る と exam え ら れ て い る. し か し, ダ イ ノ ル フ ィ ン が spinal marrow の ど の cells に 発 now し て い る か は ま だ confirm さ れ て い な い. そ こ で, after injury of spinal marrow の ダ イ ノ ル フ ィ ン の 発 now を ラ ジ オ ア イ ソ ト ー プ logo synthetic オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド プ ロ ー ブ を with い た in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン method に よ り beg し 検 た. SD ラ ッ ト の lower thoracic を vertebral arch removal し て spinal marrow に fall heavy hammer を と し, spinal marrow damage モ デ ル を made し た. ラ ッ ト を damage after 4 time か ら 1 week between で 潅 flow after fixation, spinal marrow を take り out し て biopsy を し, consummate the in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン line method を っ た. ダ イ ノ ル フ ィ ン mRNA の 発 は now 4 h after injury よ り raised plus し め, 24 h, 48 h で は injury weeks 辺 の cephalic and び caudal で the し く raised し, injury cephalic で の PPD mRNA の raised after add の reduce は paralysis の reply の み ら れ る injury after 1 w に consistent し て い た. Side, injury caudal で の PPD mRNA の raised plus の deferment は PPD mRNA 発 now ニ ュ ー ロ ン が, far mind line d に よ り influence を う け て お り, spinal marrow damage に よ っ て derepression が up こ り, activation さ れ た possibility が exam え ら る. The <s:1> tilt table Angle of each individual と the number of positive PPDmRNA cells と is related to をみると, the <s:1> correlation coefficient -0.848 <s:1> is a negative <s:1> correlation を, indicating <s:1>, and the <s:1> よく occurrence amount of とPPDmRNA <s:1> caused by <s:1> motor dysfunction 24 hours after spinal cord injury よく よく is related to て て た た た た. Spinal marrow で raised plus し た ダ イ ノ ル フ ィ ン は past に report さ れ の reduce blood flow to た や excitatory ア ミ ノ acid の raised with や, リ ン の lipid hydrolysis, な ど の メ カ ニ ズ ム を interface し て, spinal marrow に handicap of を and え て い る と exam え ら れ る. trkBmRNA injection occurs を, the same injection method で検 attacks た. The <s:1> injury site of trkBmRNA is に, the localized て is て, and the <s:1> て た た is present. BDNF (Brain derived neurotropic factor) を spinal marrow damage before よ り く も membrane with し next に cast, ダ イ ノ ル フ ィ ン mRNA 発 の now - the を 検 cable し た が, に 発 の now - the を 観 examine さ れ な か っ た.

项目成果

Tachibana, T et al: "Dynorphin mRNA expression in dorsal horn neurons following traumatic spnal cord injury" J. Neurotrauma. (In press).

Tachibana, T 等人：“创伤性脊髓损伤后背角神经元中的强啡肽 mRNA 表达”J. Neurotrauma。