OK-432由来リポタイコ酸関連分子の細胞受容体の探索

寻找源自 OK-432 的脂磷壁酸相关分子的细胞受体

• 批准号: 13877343
• 负责人: 佐藤 光信
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877343/
• 关键词: OK-432; リポタイコ酸関連分子; 細胞受容体; Toll-like receptor 4; IFN-γ; INF-α; 抗腫瘍効果; ノックアウトマウス

1.A群溶血性レンサ球菌製剤OK-432より、OK-432のIFN-γ誘導部位を認識する単クローン抗体TS-2をリガンドとしたアフィニティ・カラムを用いてリポタイコ酸関連分子OK-PSAを調製した。2.C3H/HeNマウス[Toll-like receptor(TLR)4:野生型]及びC3H/HeJマウス(TLR4:aa712^<pro→his>)から脾細胞を調製し、更に、抗アシアロGM1抗体及び抗マウスCD3抗体と反応させた後、家兎血清補体で処理して、NK及びT細胞を除去した脾細胞標品を調製した。この処理マウス脾細胞をOK-PSA(10^<-1>μg/ml)存在下で培養し、IFN-γ及びTNF-αのmRNAとタンパクの発現を、RT-PCR或いはELISAにて検索した。その結果、C3H/HeNマウスにのみIFN-γ及びTNF-αの発現を認めた。3.C3H/HeN及びC3H/HeJマウスに同系腫瘍細胞SCCVIIを移植し担癌マウスを調製し、OK-PSAを投与して治療を行った。その結果、C3H/HeNマウスにおいて、C3H/HeJマウスと比較して有意に高い抗腫瘍効果が認められた。4.C57BL/6マウスにおいて調製したTLR1-/-,TLR2-/-,TLR4-/-のノックアウトマウス及び野生型C57BL/マウスの脾細胞を上記(2)で述べたように調製し、OK-PSA存在下で培養し、IFN-γ及びTNF-αの発現誘導をRT-PCR及びELISAを用いて遺伝子・タンパクレベルで検索した。その結果、TLR-4-/-マウス脾細胞においてのみ、IFN-γ及びTNF-αの発現誘導が検出されなかった。以上の結果より、OK-PSAの細胞受容体はTLR4であることが強く示唆された。

1. Group A hemolytic レ ン サ aureus tonic OK - 432 よ り の interferons, OK - 432 - induced gamma parts を know す る 単 ク ロ ー ン antibody TS - 2 を リ ガ ン ド と し た ア フ ィ ニ テ ィ · カ ラ ム を with い て リ ポ タ イ masato コ acid molecular OK - even the PSA を modulation し た. 2.C3H/HeN ウス ウス[Toll-like Receptor (TLR) 4: wild type] and び C3H/HeJ research institute マ ウ ス (TLR4: aa712 ^ < pro - his >) か ら を modulation し spleen cells, more に, fight ア シ ア ロ this antibody and び resistance マ ウ ス と CD3 antibodies against 応 さ せ た after, home 兎 serum complement で 処 Richard し て, NK and を び T cells to remove し た spleen Cell standard を modulates た. こ の 処 Richard マ ウ ス spleen cells を OK - PSA (10 ^ < 1 > mu g/ml) in the presence of で し, IFN - gamma and び TNF alpha の mRNA と タ ン パ ク の 発 を now, rt-pcr, or い は ELISA に て 検 cable し た. The そ <s:1> results showed that C3H/HeN そ ウスに <e:1> みIFN-γ and びTNF-α <e:1> showed を recognition めた. (3) of C3H/HeN and び C3H/HeJ research institute マ ウ ス に homologous cells swollen sores SCCVII を transplantation し bear carcinoma マ ウ ス を modulation し, OK - PSA を cast and し を line っ て treatment た. そ の results, of C3H/HeN マ ウ ス に お い て, C3H/HeJ research institute マ ウ ス と compare し て intentionally に high い swollen sores unseen fruit が recognize め ら れ た. 4. C57BL / 6 マ ウ ス に お い て modulation し た TLR1 - / -, TLR2 - / -, TLR4 - / - の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス and び wild type C57BL / マ ウ ス の spleen cells を written (2) で above べ た よ う に modulation し, OK - PSA で し, in the presence of IFN - gamma and び TNF alpha の 発 induced を now Rt-pcr and び ELISA を with い て heritage 伝 child · タ ン パ ク レ ベ ル で 検 cable し た. そ の results, TLR - 4 - / - マ ウ ス spleen cells に お い て の み, IFN - gamma and び TNF alpha の 発 now induced が 検 out さ れ な か っ た. The above <s:1> results よ よ and the OK-PSA <s:1> cell acceptor <s:1> TLR4である とが とが strongly く suggest された.

项目成果

Masato Okamoto: "Severe impairment of anti-cancer effect of lioteichoic acid-related molecule isolated from a penicillin-killed Streptocuccus pygenes"Int immunopharmacol. 1(9-10). 1789-1795 (2001)

Masato Okamoto：“从青霉素杀死的化脓性链球菌中分离出的硫磷壁酸相关分子的抗癌作用严重受损”Intimmunopharmacol。

Masato Okamoto: "Comparison of cytokine-inducing activity in lipoteichoic acid-related molecule isolated from a penicillin-killed group A"Int immunopharmacol. 1(11). 1957-1968 (2001)

Masato Okamoto：“从青霉素杀死的 A 组中分离出的脂磷壁酸相关分子的细胞因子诱导活性的比较”Intimmunopharmacol。

Masato Okamoto: "Enhancement of anti-cancer immunity by lipoteichoic acid-related molecule isolated from a penicillin-killed group A Streptococcus"Cancer Immunol Immunother. 50(8). 408-418 (2001)

Masato Okamoto：“通过从青霉素杀死的 A 族链球菌中分离出的脂磷壁酸相关分子增强抗癌免疫力”癌症免疫免疫疗法。

Go Ohe: "Th1-cytokine induction and anti-tumor effect of 55kd protein isolated from Aeginetia indica L, a parasitic plant"Cancer Immunol Immunother. 50(5). 251-259 (2001)

Go Ohe：“从寄生植物 Aeginetia indica L 中分离的 55kd 蛋白的 Th1 细胞因子诱导和抗肿瘤作用”CancerImmunolImmunther。